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聚乙烯醇固定化胆固醇氧化酶的研究
引用本文:李杰民,王双双,刘倩倩,赵芳,王发合,周河治,杨辉.聚乙烯醇固定化胆固醇氧化酶的研究[J].广西农业科学,2013(4):657-661.
作者姓名:李杰民  王双双  刘倩倩  赵芳  王发合  周河治  杨辉
作者单位:[1]广西大学生命科学与技术学院,南宁530005 [2]广西农业科学院农产品加工研究所,南宁530007 [3]邯郸职业技术学院,河北邯郸056001 [4]青岛赛特香料有限公司,山东青岛266423
基金项目:广西自然科学基金项目(桂科自0728017)作者简介
摘    要:【目的】探讨类芽孢杆菌胆固醇氧化酶(COD)的固定化,为COD的应用研究提供参考依据。【方法】以不同浓度的聚乙烯醇、硼酸为主要材料制备固定化酶,并通过试验确定制备固定化酶的最适浓度、最佳反应温度、最适pH、热稳定性、酸稳定性、米氏常数及操作稳定性。【结果】选用12%聚乙烯醇、5%硼酸制备的固定化酶形状好、强度适中、易操作、固定化率高,其最适反应温度60℃,最适反应pH7.0,热、酸稳定性比游离酶好,且稳定范围较游离酶宽,表观米氏常数Km(2.55×10^-5mol/L)相对游离酶变小,重复使用5次后酶活力仍能保持在67.8%以上,半衰期为8.91次。【结论】聚乙烯醇制备的同定化COD稳定性好,与底物亲和力较强,可重复回收利用,具有良好的应用前景。

关 键 词:聚乙烯醇  胆固醇氧化酶  固定化  酶活性  稳定性  米氏常数
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