| 大豆BBi基因ihpRNA种子特异性表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 付永平,张君,王丕武,周海涛,曲静. 大豆BBi基因ihpRNA种子特异性表达载体的构建[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2010, 38(1): 83-89 |
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| 作者姓名： | 付永平 张君 王丕武 周海涛 曲静 |
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| 作者单位： | 吉林农业大学农学院; |
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| 基金项目： | 教育部博士点基金项目(20070193005) |
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| 摘 要： | 【目的】构建具有大豆蛋白酶抑制剂BBi基因反向重复结构的ihpRNA种子特异性表达载体,并将其转入根癌农杆菌中,为大豆品质改良奠定基础。【方法】采用PCR技术克隆大豆蛋白酶抑制剂BBi基因的正义和反义片段、大豆种子特异性启动子7αP和作为内含子的GFP基因片段,分别连入克隆载体pMD18-T Vector中。然后根据植物中ihpRNA原理,以植物表达载体pCAMBIA1301为基础,将组成RNAi载体的4个目的片段分别连入其中,然后利用冻融法转化根癌农杆菌,并进行PCR鉴定。【结果】PCR扩增得到组成RNAi载体的4个目的片段,分别构建成重组克隆载体和ihpRNA种子特异性表达载体p7αP-GFP-BBiS,并转化得到含有p7αP-GFP-BBiS的农杆菌EHA101和EHA105。【结论】成功构建了具有BBi基因反向重复结构的ihpRNA种子特异性表达载体p7αP-GFP-BBiS,BBi基因的ihpRNA表达框架成功转入到农杆菌中。
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| 关 键 词： | 大豆 蛋白酶抑制剂BBi基因 ihpRNA表达载体 种子特异性启动子 |
| 收稿时间： | 2009-05-14 |
Construction of ihpRNA seed-specific expressed vector of Bowman-Birk inhibitor gene from soybean |
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| FU Yong-ping,ZHANG Jun,WANG Pi-wu,ZHOU Hai-tao and Qu Jing. Construction of ihpRNA seed-specific expressed vector of Bowman-Birk inhibitor gene from soybean[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2010, 38(1): 83-89 |
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| Authors: | FU Yong-ping ZHANG Jun WANG Pi-wu ZHOU Hai-tao Qu Jing |
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| Affiliation: | FU Yong-ping,ZHANG Jun,WANG Pi-wu,ZHOU Hai-tao,Qu Jing (College of Agriculture,Jilin Agricultural University,Changchun,Jilin 130118,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | soybean Bowman-Birk inhibitor gene ihpRNA expression vector seed-specific promotor |
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