RNA干扰DGAT1和DGAT2在猪肝细胞和肌内前体脂肪细胞中表达的研究 |
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引用本文: | 吴光松,燕志宏,林鹏飞,顾丽菊,李平,任丽群,张芸.RNA干扰DGAT1和DGAT2在猪肝细胞和肌内前体脂肪细胞中表达的研究[J].中国畜牧杂志,2018(7). |
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作者姓名: | 吴光松 燕志宏 林鹏飞 顾丽菊 李平 任丽群 张芸 |
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作者单位: | 贵州大学动物科学学院;贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室;贵州大学新农村研究院;贵州优农谷生态产业有限公司;贵州省种畜禽种质测定中心;贵州省农业区域经济发展中心 |
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摘 要: | 本研究旨在探索DGAT1和DGAT2基因表达对猪脂肪沉积效率的影响。以3日龄宗地花猪为实验动物,针对DGAT1和DGAT2基因m RNA序列设计6对sh RNA序列,构建RNA干扰表达载体,将DGAT1和DGAT2的sh RNA干扰载体分别转染至猪的肝细胞和肌内前体脂肪细胞中,采用RT-q PCR筛选出肝细胞和肌内前体脂肪细胞中的最佳sh RNA干扰载体,将最佳干扰载体再次转染肝细胞和肌内前体脂肪细胞,测定细胞代谢液中甘油三酯和总胆固醇含量变化。结果表明:所构建的干扰载体对肝细胞中DGAT1和DGAT2基因的最高抑制效率分别为78.45%和87.52%,对肌内前体脂肪细胞中DGAT1和DGAT2基因的最高抑制效率分别为82.24%和89.82%;肝细胞和肌内前体脂肪细胞培养液中甘油三酯和总胆固醇的含量均降低,其中转染p GPU6/GFP/Neo-DGAT2-1实验组的肝细胞培养液中甘油三酯含量显著低于空白组(P0.05)。结果提示,抑制DGAT1和DGAT2基因的表达,可降低猪肝细胞和肌内前体脂肪细胞代谢液中甘油三酯和总胆固醇的含量。
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