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1株产褐藻胶裂解酶海洋细菌的分离鉴定及其酶学性质
作者姓名:汤海青  欧昌荣  郑晓冬
作者单位:浙江大学生物系统工程与食品科学学院;宁波出入境检验检疫局;宁波大学海洋学院
基金项目:国家星火计划资助项目(2012GA701063);钱江人才计划资助项目(2011R10072)
摘    要:利用以褐藻胶为唯一碳源的培养基分离纯化产褐藻胶裂解酶的海洋细菌,通过形态特征、生理生化和16SrRNA基因鉴定菌株,用紫外法分析纯化酶液的pH、温度作用范围及稳定性等酶学性质.结果表明:从青岛近海分离到1株产褐藻胶裂解酶的菌株QZ-4,革兰阴性杆菌,适宜生长温度和NaCl质量浓度范围分别为15~25℃和15~60g/L;16SrRNA基因序列分析显示,该菌与交替假单胞菌(Pseudoalteromonas tetraodonis)相似性为97%,GenBank登录号为HM130919;该酶具有同时降解高古罗糖醛酸聚合物和高甘露糖醛酸聚合物的能力,其最适作用pH和温度分别为7.5和40℃,Mg2+、Na+、Fe3+、Mn2+等对酶活力有促进作用,Zn2+有抑制作用,1.0mol/L乙二胺四乙酸可完全抑制其活性;由Lineweaver-Burk(L-B)作图法求得该酶的最大反应速度(Vmax)为0.541U/mL,米氏常数(Km)为0.051mg/mL.

关 键 词:海洋细菌  交替假单胞菌  16SrRNA  褐藻胶裂解酶  酶学性质
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