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微小牛蜱Bm86基因的真核表达
引用本文:李文卉 罗建勋 殷宏 关贵全 马米玲 刘志杰 刘爱红 党志胜 高金亮 任巧云. 微小牛蜱Bm86基因的真核表达[J]. 中国兽医科技, 2005, 35(9): 718-722
作者姓名:李文卉 罗建勋 殷宏 关贵全 马米玲 刘志杰 刘爱红 党志胜 高金亮 任巧云
作者单位:中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃兰州730046
基金项目:国家高技术研究发展计划(863)项目(2003AA241110);国家自然科学基金与JSPS国际合作项目(30270992)
摘    要:采用RT-PCR技术从微小牛蜱饥饿幼蜱破解物中扩增到Bm86基因,将其与巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pPlC9K重组构建了重组表达载体pPIC9K-Bm86,测序正确后将其用SacⅠ内切酶线性化后采用电穿孔法转化巴斯德毕赤酵母菌Gs115,经G418抗性筛选高拷贝重组菌株后用甲醇诱导表达,SDSPAGE和Western-blotting分析结果表明,诱导表达的培养上清液中表达出具有反应活性的68ku重组Bm86蛋白,目的蛋白约占培养上清液中蛋白总量的32%以上,诱导96h目的蛋白的表达量为0.36mg/mL。

关 键 词:微小牛蜱 Bm86基因 毕赤酵母 真核表达
文章编号:1000-6419(2005)09-0718-05
收稿时间:2005-08-15
修稿时间:2005-09-09

Eukaryotic expression of Bm86 gene of Boophilus microplus in Pichia pastoris
Li WenHui;Luo JianXun;Yan Hong;Guan GuiQuan;Ma MiLing;Liu ZhiJie;Liu AiGong;Dang ZhiSheng;Gao JinLiang;Ren QiaoYun. Eukaryotic expression of Bm86 gene of Boophilus microplus in Pichia pastoris[J]. Chinese Journal of Veterinary Science and Technology, 2005, 35(9): 718-722
Authors:Li WenHui  Luo JianXun  Yan Hong  Guan GuiQuan  Ma MiLing  Liu ZhiJie  Liu AiGong  Dang ZhiSheng  Gao JinLiang  Ren QiaoYun
Abstract:
Keywords:Boophilus microplus   Bm86 gene   Pichia pastoris    eukaryotic expression
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