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| 猪源牛病毒性腹泻病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立 | |
| 引用本文： | 邓宇,张荣,丛雁方,张建武,袁世山,文心田,郑浩.猪源牛病毒性腹泻病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立[J].畜牧兽医学报,2011,42(7). |
| 作者姓名： | 邓宇 张荣 丛雁方 张建武 袁世山 文心田 郑浩 |
| 作者单位： | 1. 四川农业大学动物医学院,雅安625014;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;西昌学院动物科学学院,西昌615000 2. 中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;西昌学院动物科学学院,西昌615000 3. 四川农业大学动物医学院,雅安,625014 |
| 基金项目： | 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2010JB15) |
| 摘 要： | 本研究旨在建立一种荧光定量PCR检测方法,用于猪源牛病毒性腹泻病毒(BVDVs)检测,同时能鉴别诊断猪瘟病毒(CSFV).根据BVDVs与CSFV 5 '-UTR保守序列,设计一套引物和特异TaqMan探针,以本实验室构建的猪源BVDVs 5′-UTR阳性重组质粒为标准品,通过优化反应条件,建立了标准曲线.以构建的标准品为模板进行了特异性、敏感性、重复性试验、并应用于临床检测.结果显示,该方法检测CSFV、猪繁殖与呼吸综合征病毒均为阴性；最低可检测到每个反应相当于10拷贝的标准品DNA；重复性试验的批内变异系数为0.20％～0.95％；应用所建立方法对临床样品进行检测,其结果与普通RT-PCR结果的符合率为86.7％.本研究建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可用于猪感染BVDVs、猪瘟疫苗污染BVDVs的监测. |
| 关 键 词： | 猪源牛病毒性腹泻病毒 实时荧光定量RT-PCR TaqMan探针 |
Development of Real-time Fluorescence Quantitative PCR Assay for Detection of Bovine Viral Diarrhea Virus in Pigs |
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| DENG Yu , ZHANG Rong , CONG Yan-fang , ZHANG Jian-wu , YUAN Shi-shan , WEN Xin-tian , ZHENG Hao.Development of Real-time Fluorescence Quantitative PCR Assay for Detection of Bovine Viral Diarrhea Virus in Pigs[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2011,42(7). | |
| Authors: | DENG Yu ZHANG Rong CONG Yan-fang ZHANG Jian-wu YUAN Shi-shan WEN Xin-tian ZHENG Hao |
| Institution: | DENG Yu1,2,3,ZHANG Rong2,CONG Yan-fang2,ZHANG Jian-wu2,YUAN Shi-shan2,WEN Xin-tian1,ZHENG Hao2 (1.College of Veterinary Medicine,Sichuan Agricultural University,Yaan 625014,China,2.Shanghai Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Shanghai 200241,3.School of Animal Science,Xichang College,Xichang 615000,China) |
| Abstract: | |
| Keywords: | pig bovine viral diarrhea virus real-time fluorescence quantitative PCR TaqMan probe |
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