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| 马铃薯Y病毒脉坏死株系(PVYN)外壳蛋白基因的克隆、表达及其间接ELISA方法的建立 | |
| 作者姓名： | 高方方 吴忠义 黄丛林 孙惠生 曾申明 |
| 作者单位： | [1]中国农业大学动物科技学院,北京100094 [2]北京市农林科学院生物中心,北京100097 [3]北京中际国华马铃薯开发中心,北京102100 |
| 摘 要： | 【目的】制备马铃薯Y病毒脉坏死株系（PVY^N）多克隆抗体,建立间接ELISA法用于检测PVY^N病毒。【方法】依据PVY^N的CP基因序列设计引物,利用RT-PCR方法获得CP基因并连接构建到原核表达载体,进行原核表达,以纯化的重组蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔,获得PVY^N的抗血清并纯化。【结果】测序结果与其他已知序列比较,PVYNCP基因的核苷酸同源性95%,推断氨基酸的同源性达98%。以纯化蛋白为抗原进行免疫,成功获得了PVY^N外壳蛋白抗血清,纯化后的IgG采用间接ELISA法检测抗原,抗体效价达1：500,使用该抗体稀释度检测感染植株,结果呈阳性。【研究结论】通过分子生物学途径获得了PVY^N的多克隆抗体,建立的间接ELISA方法可以用于PVY^N的病毒检测。 |
| 关 键 词： | 马铃薯Y病毒脉坏死株系 原核表达 多克隆抗体 ELISA 马铃薯 病毒 脉坏死 株系 PVYN 外壳蛋白基因 克隆 表达 Indirect ELISA 方法 Clone necrosis Virus Potato Coat Protein Gene Expression Method EUSA 生物学途径 分子 |
Clone,Expression of Coat Protein Gene of Potato Virus Y-Vein necrosis(PVYN)and its Establishment of Indirect ELISA Method |
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| Authors: | Gao Fangfang Wu Zhongyi Huang Conglin Sun Huisheng Zeng Shenming |
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