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鸡局部黏着斑激酶基因5′UTR及启动子的克隆鉴定
作者姓名:李淑锋  王利祥  张大鹏  华子春
作者单位:南京大学医药生物技术国家重点实验室,江苏,南京,210093;东南大学基础医学院,江苏,南京,210009 南京大学医药生物技术国家重点实验室,江苏,南京,210093 南京大学医药生物技术国家重点实验室,江苏,南京,210093 南京大学医药生物技术国家重点实验室,江苏,南京,210093
摘    要:为了研究鸡局部黏着斑激酶(FAK)基因表达调控的分子机制,运用cDNA末端快速扩增技术确定了鸡胚成纤维细胞FAK基因的转录起始位点,并发现FAK基因mRNA的5′非翻译区(5′UTR)存在4种剪切形式.分析这4种剪切形式的5′端序列,发现它们都不影响蛋白的编码,但可能影响mRNA的翻译效率.另外,将启动子序列935 bp片段克隆构建到荧光素酶报告基因表达载体pGL3-Basic中,转染鸡胚成纤维细胞,测定启动子的转录活性.通过启动子序列系列缩短的克隆,将核心启动子区定位在转录起始位点上游-662至+7的669 bp片段内,该启动子的典型特征是:没有TATA盒,而富含“GC“碱基.以上结果为FAK基因的表达调控研究提供了分子基础.

关 键 词:局部黏着斑激酶基因(FAK)  5′非翻译区(5′UTR)  可变剪切  cDNA末端快速扩增技术
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