鸡β－防御素－2基因的克隆及原核表达载体的构建

鸡β－防御素是一类广谱抗茵阳离子小肽的总称，一般具有3个分子内二硫键。防御素对细菌、真菌乃至某些被膜病毒具有广谱杀伤作用。试验根据已发表的Gal－2基因序列，设计并合成了一对引物。以骨髓中的总RNA为模板，利用RT—PCR技术扩增目的片段并克隆到pGEM—TEasy载体上，经筛选鉴定获得阳性重组子pGEM—T—Gal－2。再经EcoRI、XbaI双酶切，插入pMAL—c2x质粒构建表达载体。利用PCR技术和酶切反应筛选转化子成功获得pMAL—c2x—Gal－2重组质粒。