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双向电泳结合蛋白质印迹技术分析猪囊尾蚴乳酸脱氢酶
引用本文:方文,包怀恩,肖靓靓,牟荣. 双向电泳结合蛋白质印迹技术分析猪囊尾蚴乳酸脱氢酶[J]. 黑龙江畜牧兽医, 2011, 0(15)
作者姓名:方文  包怀恩  肖靓靓  牟荣
作者单位:贵阳医学院医学检验系;贵阳医学院寄生虫学教研室;
基金项目:国家自然科学基金项目(30660168)
摘    要:为了研究猪囊尾蚴乳酸脱氢酶(LDH)的表达,试验选择四川省雅江县呷拉乡猪带绦虫病患者,给其口服槟榔-南瓜子驱虫,收集、制备虫卵悬液(8万个/mL),再给3头20日龄三元杂交乳猪猪灌胃虫卵悬液,每头1 mL,40 d后收集、制备猪囊尾蚴蛋白,进行双向电泳(2-DE)分析,将凝胶蛋白斑点转移至聚偏氟乙烯膜(PVDF膜),用自制的大鼠抗猪带绦虫LDH血清作为一抗、健康大鼠血清作为阴性对照进行蛋白质印迹(Western-blotting)分析。结果表明:双向电泳凝胶共检测到(207±9)个蛋白质斑点,相对分子质量(Mr)为14 400~94 000,等电点(pI)为3.0~10.0;试验组特异性抗原抗体阳性杂交斑点为1个,阴性对照未见阳性杂交斑点;将Western-blotting检测的抗原抗体阳性杂交斑点与原双向电泳凝胶斑点进行比对,找到对应蛋白斑点,经ImageMaster 2D Platinum 5.0软件分析后初步确定该蛋白斑点的pI/Mr为7.03/35 368,与猪带绦虫LDH的pI/Mr理论推导值接近,说明猪囊尾蚴表达LDH。

关 键 词:猪带绦虫  囊尾蚴  乳酸脱氢酶  双向电泳  蛋白质印迹  

Analysis of lactate dehydrogenase expression in Taenia solium cysticerci by two dimensional electrophoresis and Western-blotting
FANG Wen,BAO Huai-en,XIAO Liang-liang,MOU Rong. Analysis of lactate dehydrogenase expression in Taenia solium cysticerci by two dimensional electrophoresis and Western-blotting[J]. Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine, 2011, 0(15)
Authors:FANG Wen  BAO Huai-en  XIAO Liang-liang  MOU Rong
Affiliation:FANG Wen1,BAO Huai-en2,XIAO Liang-liang2,MOU Rong2(1.Department of Clinical Laboratory Sciences,Guiyang Medical College,Guiyang 550004,China,2.Department of Parasitology,China)
Abstract:
Keywords:Taenia solium  cysticercus  lactate dehydrogenase  two-dimensional electrophoresis  Western-blotting  
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