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副猪嗜血杆菌aroA基因自杀载体的构建
引用本文:贺云霞,徐慧,叶飞,孙慧玲,王宏俊,龚玉梅,黄秀芬,张莉,张培君. 副猪嗜血杆菌aroA基因自杀载体的构建[J]. 黑龙江畜牧兽医, 2011, 0(13)
作者姓名:贺云霞  徐慧  叶飞  孙慧玲  王宏俊  龚玉梅  黄秀芬  张莉  张培君
作者单位:北京市农林科学院畜牧兽医研究所;首都师范大学生命科学学院;
基金项目:“863”国家高技术研究发展计划项目(2006AA10A206); 国家自然科学基金项目(31001072)
摘    要:为了构建副猪嗜血杆菌aroA基因插入突变自杀载体,试验采用自杀质粒介导的同源重组方法首先构建了自杀质粒pSD,根据副猪嗜血杆菌aroA基因设计PCR特异性引物,上游引物5'末端加BamHⅠ位点,下游引物5'末端加SalⅠ位点,PCR扩增aroA基因后连接到T载体,经酶切位点分析发现在aroA中有1个HindⅢ位点,将氯霉素表达盒通过该位点,构建T-aroA-cm载体,再通过BamHⅠ和SalⅠ将aroA-cm定向克隆到自杀质粒pSD中。结果表明:成功获得aroA基因插入突变自杀载体。说明进一步进行同源重组,从而构建副猪嗜血杆菌aroA基因插入突变株。

关 键 词:副猪嗜血杆菌  aroA  自杀载体  

Constuction of suiside vector of aroA gene of Haemophilus parasuis
HE Yun-xia,XU Hui,YE Fei,SUN Hui-ling,WANG Hong-jun,GONG Yu-mei,HUANG Xiu-fen,ZHANG Li,ZHANG Pei-jun. Constuction of suiside vector of aroA gene of Haemophilus parasuis[J]. Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine, 2011, 0(13)
Authors:HE Yun-xia  XU Hui  YE Fei  SUN Hui-ling  WANG Hong-jun  GONG Yu-mei  HUANG Xiu-fen  ZHANG Li  ZHANG Pei-jun
Affiliation:HE Yun-xia1,XU Hui1,YE Fei2,SUN Hui-ling1,WANG Hong-jun1,GONG Yu-mei1,HUANG Xiu-fen1,ZHANG Li1,ZHANG Pei-jun1(1.Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine of Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences,Beijing 100097,China,2.College of Life Science,Capital Normal University,Beijing 100048,China)
Abstract:
Keywords:Haemophilus parasuis  aroA  suicide vector  
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