| 放射性EMSA实验体系的优化 |
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| 引用本文： | 贾小彦,朱鸿亮,朱本忠,罗云波.放射性EMSA实验体系的优化[J].农业生物技术学报,2008,16(2). |
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| 作者姓名： | 贾小彦 朱鸿亮 朱本忠 罗云波 |
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| 作者单位： | 中国农业大学食品学院 |
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| 摘 要： | EMSA全称为电泳迁移率改变分析法，是目前研究核转录因子体外结合特性最常用的方法，但同时同位素对人体会有潜在的放射性损伤，使实验操作变得复杂。为了提高EMSA实验的稳定性和成功率，以降低实验人员接触同位素的频率，本研究对放射性EMSA实验体系进行了优化。结果表明：探针的纯化有效地降低了自显影的背景；蛋白的离心有利于获得整齐清晰的条带；采用350V的电压并且在4°C进行电泳，保证了电泳过程中DNA-蛋白复合物的稳定结合；拭去凝胶表面带有放射性的液体，并将凝胶附着于有一定硬度的纸片有利于得到清晰的显影图片。试验表明优化后的体系有效地提高了EMSA实验的稳定性和成功率。
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| 关 键 词： | 放射性EMSA 转录因子 优化 |
| 收稿时间： | 2007-7-19 |
| 修稿时间： | 2007-10-9 |
Optimization for radioactive EMSA system |
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