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| 人工合成Cecropin AD基因在酵母中表达 | |
| 引用本文： | 郑青,黄自然,姚汝华,苏智慧,郑学勤,王宇光.人工合成Cecropin AD基因在酵母中表达[J].蚕业科学,1999,25(3):2-3. |
| 作者姓名： | 郑青 黄自然 姚汝华 苏智慧 郑学勤 王宇光 |
| 作者单位： | 1. 华南农业大学,广州,510642 2. 华南理工大学生物工程系 3. 日本生命志研究馆 4. 国家热带作物生物技术重点实验室 |
| 摘 要： | Ｃｅｃｒｏｐｉｎ ＡＤ 是由Ｃｅｃｒｏｐｉｎ Ａ的Ｎ 端１ １１ 位氨基酸残基和Ｃｅｃｒｏｐｉｎ Ｄ 的Ｃ 端１２ ３７ 位氨基酸残基构成的一个杂合肽，抗菌活性高于天然抗菌肽。根据Ｃｅｃｒｏｐｉｎ ＡＤ 的氨基酸序列，以酵母偏爱密码设计了Ｃｅｃｒｏｐｉｎ ＡＤ 基因，全长１４０ｂｐ 。采用基因片段化学合成结合ＰＣＲ 法合成Ｃｅｃｒｏｐｉｎ ＡＤ 基因。合成的Ｃｅｃｒｏｐｉｎ ＡＤ 基因克隆到ｐＣＲＴＭ２１ 上，进行ＤＮＡ 序列测定，证实合成的Ｃｅｃｒｏｐｉｎ ＡＤ 基因的ＤＮＡ 序列与设计序列完全一致。将Ｃｅｃｒｏｐｉｎ 基因定向克隆到大肠杆菌 酵母穿梭质粒ｐＣＬＷＡ２ 的Ｂａｍ ＨＩ和Ｓａｌ Ⅰ位点上，构建成含Ｃｅｃｒｏｐｉｎ 基因的重组质粒ｐＣＡＤ，将重组质粒转化入宿主酵母ＡＢ１０３ ，以大肠杆菌Ｋ１２Ｄ３１ 为指示菌，用活性蛋白酸性ＰＡＧＥ 法测定，具有抑菌活性，表明Ｃｅｃｒｏｐｉｎ 基因在酵母中获得表达。 |
| 关 键 词： | 抗菌肽 基因 合成 表达 |
| 修稿时间： | 1998-05-15 |
Expression of Synthetic Cecropin AD Gene in Yeast |
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| Zheng Qing,Huang Ziran,Yao Ruhua,Su Zhihui,Zheng Xueqin,Wang Yuguang.Expression of Synthetic Cecropin AD Gene in Yeast[J].Acta Sericologica Sinica,1999,25(3):2-3. | |
| Authors: | Zheng Qing Huang Ziran Yao Ruhua Su Zhihui Zheng Xueqin Wang Yuguang |
| Abstract: | Cecropin ADisa hybrid peptidethatexhibitsgreaterantibacterialactivitythanthe naturalCecropinsanditisconsistof1 11aminoacidresiduesinthe N endofcecropin Aand 12 37 aminoacidresiduesinthe C endof Cecropin D.Basedontheamino acidsequenceofCecropin AD, Cecropin ADgene was designed accordingtothe coden usageofyeast.The designed gene was140 bp in size synthesized bythe combination ofoligo deoxynucletidessynthesisand PCRmethod.The PCRproduct wasclonedintothe pCRTM2.1 vector.Thesynthetic gene was provedto be correctby therestriction patten andthe DNAsequenceanalysis.Thesynthetic Cecropin ADgene wasinserted intothe E.coli yeastshuttle plasmid pCLWA2 which contains an α factor promoterleader system . The recombinantplasimid wastransferredinto yeast host AB103.Using E.coli K12D31 asindicator strain ,theexpressed productdisplayed antibacterialactivity bytestofacidic PAGE. |
| Keywords: | Cecropin Gene Synthesize Expression |
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