| 传染性法氏囊病病毒抗原表位与乙型肝炎病毒核心抗原嵌合基因的构建及其表达产物分析 |
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| 引用本文： | 刘小娟,王永山,欧阳伟,张海彬,王忠灿,唐雨德. 传染性法氏囊病病毒抗原表位与乙型肝炎病毒核心抗原嵌合基因的构建及其表达产物分析[J]. 中国预防兽医学报, 2010, 32(11). DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2010.11.12 |
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| 作者姓名： | 刘小娟 王永山 欧阳伟 张海彬 王忠灿 唐雨德 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，江苏省自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位基因5epis的免疫效力,本研究应用重叠延伸PCR技术,在乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因的231位～232位核苷酸(77位～78位氨基酸残基)之间插入BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点,构建基于HBcAg修饰基因(mHBc)的抗原表位嵌合体基因分子载体pET-mHBc。将编码IBDV多表位基因5epis定向插入到pET-mHBc的mHBc基因中,获得嵌合体基因mHBc-5epis表达重组质粒pET-mHBc-5epis,并在大肠杆菌中表达。经SDS-PAGE分析,重组嵌合体蛋白的分子量约29 ku,表达量约占菌体总蛋白的47.6%;Western blot结果表明,重组嵌合体蛋白可与IBDV抗体反应形成1条特异性蛋白带;重组嵌合体蛋白呈病毒样颗粒(VLP),直径约100 nm～120 nm;用IBDV抗体夹心ELISA检测,抗原效价达到1∶200。本实验成功构建了5epis与HBcAg嵌合体基因,并在大肠杆菌中高效表达,具有IBDV抗原反应性的重组病毒样颗粒嵌合体蛋白,为研究其表位型基因工程疫苗提供了新途径。
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| 关 键 词： | 传染性法氏囊病病毒 抗原表位 乙肝病毒核心抗原(HBcAg) 嵌合体 |
Molecular design and immunogenic analysis for the IBDV mimotope and HBcAg chimera |
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| LIU Xiao-juan,WANG Yong-shan,OUYANG Wei,ZHANG Hai-bin,WANG Zhong-can,TANG Yu-de. Molecular design and immunogenic analysis for the IBDV mimotope and HBcAg chimera[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2010, 32(11). DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2010.11.12 |
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| Authors: | LIU Xiao-juan WANG Yong-shan OUYANG Wei ZHANG Hai-bin WANG Zhong-can TANG Yu-de |
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