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应用RACE技术扩增驴DGAT1基因3′端及序列分析
作者姓名:肖海霞  托乎提·阿及德  田可川  刘明军  陈从英
作者单位:1. 新疆畜牧科学院,乌鲁木齐,830000
2. 江西农业大学江西省动物生物技术重点实验室,南昌,330045
基金项目:国家公益性行业(农业)科研专项,农业科技成果转化资金项目,新疆维吾尔自治区科研院所改革与发展专项资金,新疆维吾尔自治区科技支疆项目,新疆维吾尔自治区动物生物技术重点开放实验室,新疆畜牧科学院院青年基金
摘    要:DGAT1(脂酰辅酶A:二脂酰甘油酰基转移酶)基因是产奶性状的一个重要功能侯选基因。由于通过预测奶牛DGAT1基因序列与马属动物DGAT1基因序列具有98%的同源性,本试验从影响牛产奶性状的DGAT1基因出发,以驴乳腺组织的RNA为模板,按照不同物种DGAT1基因的相似性设计特异引物,运用PCR和3′RACE技术扩增并获得了特异片断,特异片段回收纯化连接到pUCmT Vector载体后,转化到大肠杆菌中并筛选阳性菌落;提取质粒进行测序,结果发现该段序列与预期的目标一致,通过与其他动物同源性比较分析说明已首次克隆到驴DGAT1基因3′端。

关 键 词:RACE技术    DGAT1  基因3′端  序列分析
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