| 永生化尼罗罗非鱼巨噬细胞系的建立及鉴定 |
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| 引用本文： | 张永德,潘传燕,余艳玲,冯鹏霏,罗洪林. 永生化尼罗罗非鱼巨噬细胞系的建立及鉴定[J]. 水产学报, 2018, 42(3): 376-387 |
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| 作者姓名： | 张永德 潘传燕 余艳玲 冯鹏霏 罗洪林 |
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| 作者单位： | 广西水产科学研究院 广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室,广西水产科学研究院 广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室,广西水产科学研究院 广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室,广西水产科学研究院 广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室,广西水产科学研究院 广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目（31372553），广西自然科学基金（2015GXNSFAA139068） |
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| 摘 要： | 为获得具有单一克隆特性的能稳定传代培养的罗非鱼巨噬细胞系,本研究从尼罗罗非鱼腹腔中分离纯化巨噬细胞,采用EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染,筛选单克隆细胞的方法建立了尼罗罗非鱼巨噬细胞系,并对其进行了EBV感染鉴定、电镜观察、端粒酶活性检测、致癌性评估、核型分析以及分子生物学鉴定。研究表明,EBV已整合到尼罗罗非鱼巨噬细胞中且稳定表达,经30代稳定传代,该细胞系仍维持较好的增殖状态;该细胞系表面不平滑,有明显的钝圆形突起和细长的伪足,表现为典型的巨噬细胞形态;端粒酶活性显著高于未经感染的巨噬细胞,而与He La细胞差异不显著,且该细胞系不具有致癌性,说明永生化细胞系构建成功。核型分析结果发现,该细胞系具有44条染色体,其核型公式为2 n=2 x=44=4 sm+17 st+1 t。PCR检测发现,该细胞系存在CD33和CD205的转录本,这些都是单核巨噬细胞的标志物,经18S r RNA检测证明该细胞系来自尼罗罗非鱼巨噬细胞。永生化尼罗罗非鱼巨噬细胞系已被成功建立,该细胞系为研究罗非鱼链球菌HSP70-肽疫苗的高保护率,以及罗非鱼的免疫防御机制提供了工具。
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| 关 键 词： | 罗非鱼 巨噬细胞 永生化 细胞系 |
| 收稿时间： | 2017-04-18 |
| 修稿时间： | 2017-08-04 |
Establishment and identification of immortalized macrophage cell line of tilapia (Oreochromis niloticus) |
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| ZHANG Yongde,PAN Chuanyan,YU Yanling,FENG Pengfei and LUO Honglin. Establishment and identification of immortalized macrophage cell line of tilapia (Oreochromis niloticus)[J]. Journal of Fisheries of China, 2018, 42(3): 376-387 |
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| Authors: | ZHANG Yongde PAN Chuanyan YU Yanling FENG Pengfei LUO Honglin |
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| Affiliation: | Guangxi Academy of Fishery Sciences,,,,Guangxi Academy of Fishery Sciences |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Tilapia Macrophages Immortalization Cell line |
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