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抗草甘膦转基因大豆Cp4-epsps基因快速简便的LAMP检测方法
引用本文:朱琳峰,彭焕,黄文坤,张东升,孔令安,彭德良.抗草甘膦转基因大豆Cp4-epsps基因快速简便的LAMP检测方法[J].植物保护,2015,41(3):86-92.
作者姓名:朱琳峰  彭焕  黄文坤  张东升  孔令安  彭德良
作者单位:1. 山东农业大学植物保护学院植物病理学系, 泰安271018; 2. 潍坊科技学院, 寿光262700
基金项目:国家自然科学基金(30870007); 山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金(SDAIT-04-022-06)
摘    要:针对抗草甘膦转基因大豆的外源基因Cp4-epsps,建立了一种基于环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术的抗草甘膦转基因大豆的检测体系,其扩增产物既可利用常规琼脂糖凝胶电泳检测,还可通过SYBR Green I染色进行快速检测。LAMP检测体系中dNTPs浓度为0.8 mmol/L、Mg2+浓度为3mmol/L、反应时间为45min时扩增效果最佳,其检测灵敏度为5μg/L,比常规PCR灵敏100倍。田间实际检测结果表明,LAMP检测结果和PCR检测结果完全一致,准确率为100%。本研究所建立的抗草甘膦转基因大豆LAMP检测方法具有简便快速、特异性强、灵敏度高等特征,是一种能够用于抗草甘膦转基因大豆检测、田间基因漂移监测和环境安全研究的有力工具。

关 键 词:禾谷丝核菌    原生质体    制备    再生
收稿时间:2014/4/11 0:00:00
修稿时间:2014/6/25 0:00:00

Rapid and simple detection of Cp4-epsps gene in glyphosate-resistant soybean by loop-mediated isothermal amplification
Zhang Dezhen,Chen Xiaoxi,Gao Xianyue,Yu Jinfeng.Rapid and simple detection of Cp4-epsps gene in glyphosate-resistant soybean by loop-mediated isothermal amplification[J].Plant Protection,2015,41(3):86-92.
Authors:Zhang Dezhen  Chen Xiaoxi  Gao Xianyue  Yu Jinfeng
Institution:State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China
Abstract:
Keywords:Rhizoctonia cerealis  protoplast  preparation  regeneration
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