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丝瓜LcPPO1基因CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建
引用本文:陈敏氡,王彬,刘建汀,叶新如,曾美娟,朱海生,温庆放,康玉妹.丝瓜LcPPO1基因CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建[J].安徽农业科学,2021,49(3):105-109.
作者姓名:陈敏氡  王彬  刘建汀  叶新如  曾美娟  朱海生  温庆放  康玉妹
作者单位:福建省蔬菜遗传育种重点实验室,福建省农业科学院作物研究所,蔬菜研究中心/福建省蔬菜工程技术研究中心,福建福州350013;福建省蔬菜遗传育种重点实验室,福建省农业科学院作物研究所,蔬菜研究中心/福建省蔬菜工程技术研究中心,福建福州350013;福建省蔬菜遗传育种重点实验室,福建省农业科学院作物研究所,蔬菜研究中心/福建省蔬菜工程技术研究中心,福建福州350013;福建省蔬菜遗传育种重点实验室,福建省农业科学院作物研究所,蔬菜研究中心/福建省蔬菜工程技术研究中心,福建福州350013;福建省蔬菜遗传育种重点实验室,福建省农业科学院作物研究所,蔬菜研究中心/福建省蔬菜工程技术研究中心,福建福州350013;福建省蔬菜遗传育种重点实验室,福建省农业科学院作物研究所,蔬菜研究中心/福建省蔬菜工程技术研究中心,福建福州350013;福建省蔬菜遗传育种重点实验室,福建省农业科学院作物研究所,蔬菜研究中心/福建省蔬菜工程技术研究中心,福建福州350013;福建省蔬菜遗传育种重点实验室,福建省农业科学院作物研究所,蔬菜研究中心/福建省蔬菜工程技术研究中心,福建福州350013
基金项目:福建省属公益类专项;福建省自然科学基金项目;福建省农业科学院科技创新团队建设项目;国家大宗蔬菜产业技术体系福州综合试验站项目;设施蔬菜种质收集及基因发掘、品种创新与产业化;福建省现代蔬菜产业技术体系岗位专家项目
摘    要:目的]通过CRISPR/Cas9系统构建丝瓜LcPPO1基因编辑载体.方法]根据前期已经克隆得到的LcPPO1基因序列,设计2个sgRNA靶位点序列,退火制备sgRNA双链,分别与线性PCA1301-Cas9载体连接获得2个重组载体,将重组载体转化DH5α感受态细胞,再对其进行PCR鉴定及测序比对分析.结果]2个sgRNA靶位点序列已经分别准确地连入PCA1301-Cas9载体,插入序列无突变.结论]成功构建了丝瓜LcPPO1基因编辑载体PCA1301-Cas9-sgRNA1和PCA1301-Cas9-sgRNA2,为后续研究丝瓜LcPPO1基因功能奠定了基础.

关 键 词:丝瓜  LcPPO1基因  CRISPR/Cas9技术  基因编辑

Construction of CRISPR/Cas9 Gene Editing Vector of LcPPO1 Gene in Luffa
CHEN Min-dong,WANG Bin,LIU Jian-ting.Construction of CRISPR/Cas9 Gene Editing Vector of LcPPO1 Gene in Luffa[J].Journal of Anhui Agricultural Sciences,2021,49(3):105-109.
Authors:CHEN Min-dong  WANG Bin  LIU Jian-ting
Abstract:
Keywords:
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