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猪瘟病毒E0基因在CHO细胞中的表达
引用本文:陈振海,范学政,夏春,王琴,宋立,王在时,宁宜宝.猪瘟病毒E0基因在CHO细胞中的表达[J].中国预防兽医学报,2005(6).
作者姓名:陈振海  范学政  夏春  王琴  宋立  王在时  宁宜宝
作者单位:中国农业大学动物医学院 北京100094 (陈振海),中国兽医药品监察所农业部兽药创新与生物安全评价重点开放实验室 北京100081 (范学政,王琴,宋立,王在时),中国农业大学动物医学院北京 100094 (夏春),中国兽医药品监察所农业部兽药创新与生物安全评价重点开放实验室 北京100081(宁宜宝)
基金项目:国家重点基础研究发展规划项目(G1999011903),国家自然科学基金项目(30270984)
摘    要:将EGFPE0融合基因插入哺乳动物细胞表达载体pCI-dhfr中,构建重组质粒pCI-EGFPE0。将重组质粒转染CHO(dhfr-),在荧光显微镜下观察到少数细胞呈现绿色荧光,表明转染成功。通过MTX加压筛选后,在荧光显微镜下观察到多数细胞呈现强绿色荧光,表明重组融合蛋白EGFPE0在CHO细胞中得到大量表达。高效表达重组融合蛋白细胞克隆的获得为进一步大量制备可溶性的猪瘟病毒E0糖蛋白、制备其单抗筛选抗原表位及研究E0蛋白的生物学功能奠定基础。

关 键 词:猪瘟病毒  E0蛋白  增强型水母绿色荧光蛋白  CHO细胞

Expression of CSFV E0 gene in CHO cells
CHEN Zhen-hai,FAN Xue-zheng,XIA Chun,WANG Qin.Expression of CSFV E0 gene in CHO cells[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2005(6).
Authors:CHEN Zhen-hai  FAN Xue-zheng  XIA Chun  WANG Qin
Institution:CHEN Zhen-hai~2,FAN Xue-zheng~1,XIA Chun~2,WANG Qin~
Abstract:The EGFP-E0 gene was cloned into pCI-dhfr,a CHO(dhfr~-) cell expression vector.Following the transfection,some CHO cells presented dotted green fluorescence.Then,with MTX selection,strong fluorescence appears in a large number of CHO cells,which suggests that CHO cell clones with highly efficient expression of recombinant protein have been achieved.This will establish a good foundation for production of soluble CSFV E0 glycoprotein,monoclonal antibody preparation for filtering antigen epitope and investigating biological functions of E0 protein.
Keywords:CSFV  E0  EGFP  CHO
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