| MDCK细胞ISG15基因的克隆表达及抗病毒活性分析 |
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| 引用本文： | 刘爱玲,潘杰,庞运倩,于可响,马秀丽,宋敏训.MDCK细胞ISG15基因的克隆表达及抗病毒活性分析[J].浙江农业学报,2015(2):154-159. |
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| 作者姓名： | 刘爱玲 潘杰 庞运倩 于可响 马秀丽 宋敏训 |
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| 作者单位： | 山东师范大学生命科学学院;山东农业大学动物科技学院;山东省农业科学院家禽研究所 |
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| 基金项目： | 公益性行业(农业)科研专项(201303046-06);国家国际科技合作专项(2014DFA31900) |
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| 摘 要： | 为了解ISG15基因体外抗病毒机制,应用RT-PCR方法扩增了MDCK细胞的ISG15基因,经测序分析,该基因序列与Gen Bank中登录的犬属ISG15基因序列相似性为99%。将该基因亚克隆至p ET-28a载体构建出重组原核表达质粒p28a-M15;工程菌p28a-M15/BL21经IPTG诱导表达,获得了约22 k D的重组目的蛋白,重组蛋白经Ni2+柱层析纯化。于H9N2亚型禽流感病毒S2株感染前后在MDCK细胞中定量加入纯化的ISG15蛋白,结果显示,病毒感染MDCK细胞前加入ISG15蛋白可以抑制病毒的复制,但病毒感染后添加该蛋白则促进了病毒的复制。
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| 关 键 词： | ISG15 MDCK细胞系 抗病毒活性 H9N2 |
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