猪源嗜性衣原体HB1043株主要外膜蛋白(MOMP)基因的分析及重组表达 |
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引用本文: | 闫少侠,田永祥,刘泽文,袁芳艳,郭锐,段正赢,杨克礼,孟丽,周丹娜. 猪源嗜性衣原体HB1043株主要外膜蛋白(MOMP)基因的分析及重组表达[J]. 湖北农业科学, 2013, 52(4) |
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作者姓名: | 闫少侠 田永祥 刘泽文 袁芳艳 郭锐 段正赢 杨克礼 孟丽 周丹娜 |
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作者单位: | 1. 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,武汉430064;华中农业大学动物科学技术学院,武汉430070 2. 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,武汉,430064 |
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基金项目: | 湖北省自然科学基金,动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室开放课题 |
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摘 要: | 根据GenBank中衣原体主要外膜蛋白(MOMP)全基因序列设计特异性引物,以临床分离的衣原体病原中提取的衣原体全基因组为模板,利用特异性引物PCR扩增得到MOMP全基因序列.通过BLAST比对,结果显示其与已提交的猪流产衣原体CG1株的MOMP序列(EU531729)有1个碱基不同.根据对测序结果进行信号肽序列预测及内切酶位点分析,选用BamH Ⅰ和Sal Ⅰ双酶切将目的蛋白序列克隆到表达载体pET-28a上,得到重组质粒pET-28a-MOMP.将重组质粒转化入E coli BL21进行表达,表达产物使用镍离子亲和层析柱进行纯化得到目的蛋白rMOMP.目的蛋白经Western-blot检测,证明其具有免疫学活性.
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关 键 词: | 猪流产嗜性衣原体 主要外膜蛋白(MOMP) 重组表达 |
Cloning and Expression of Major Outer Membrane Protein of Chlamydophila Clinical Strain HB1043 from Swine |
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Abstract: | |
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Keywords: | Chlamydophila major outer membrane protein recombined expression |
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