| 木霉β—1，3—1，4—葡聚糖酶性质及其cDNA片段克隆 |
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| 引用本文： | 孙建义,李卫芬,许梓荣,廖玉华.木霉β—1，3—1，4—葡聚糖酶性质及其cDNA片段克隆[J].农业生物技术学报,2001,9(1):81-85. |
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| 作者姓名： | 孙建义 李卫芬 许梓荣 廖玉华 |
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| 作者单位： | 浙江大学华家池校区动物科学学院饲料科学研究所, |
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| 基金项目： | 高等学校骨干教师资助计划资助，国家自然科学基金（30000118） |
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| 摘 要： | 本研究探讨了里氏木霉GXC的-1,3-1,4-葡聚糖酶特性，克隆和分析了酶基因片段。结果表明，粗酶液经硫酸铵沉淀、SephadexG-25、SephadexG-100和DEAE-SephadexA-50柱层析得到纯-1,3-1,4-葡聚糖酶；经12.5%SDS-PAGE凝胶电泳表明，该酶的分子量为35.21kD；酶最适反应pH5.0，最适反应温度为60℃；Michaelis-Menten动力学分析表明，-1,3-1,4-葡聚糖酶的Km和Vmax分别为10.86mg/mL和14286mol/(minmg)。通过RT-PCR方法扩增并克隆了-1,3-1,4-葡聚糖酶cDNA片段，测序表明,该片段长度为280bp；同源性分析显示，该cDNA片段与水解淀粉芽孢杆菌、厌氧真菌OrpinomycesstrainPC-2、枯草芽孢杆菌中的-1,3-1,4-葡聚糖酶的基因片段有较高的同源性，分别为90%，79%，91%。
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| 关 键 词： | 里氏木霉GXC β－1 3－1 4－葡聚糖酶 酶学性质 克隆 测序 |
| 修稿时间： | 2000年7月17日 |
Study on the Properties of -1,3-1,4-glucanase;Cloning and Sequence Analysis of cDNA Fragment from Trichoderma reesei |
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| Sun Jianyi,Li Weifeng,Xu Zirong,Liao Yuhua.Study on the Properties of -1,3-1,4-glucanase;Cloning and Sequence Analysis of cDNA Fragment from Trichoderma reesei[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2001,9(1):81-85. |
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| Authors: | Sun Jianyi Li Weifeng Xu Zirong Liao Yuhua |
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