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反义RNA介导的抗猪传染性胃肠炎病毒感染
作者姓名:于晓龙
作者单位:黑龙江省农业科学院畜牧研究中心 哈尔滨150086
基金项目:致谢:试验是2004年完成于东北农业大学动物医学院预防兽医系,在此感谢李一经教授的悉心指导.
摘    要:构建了重组逆转录病毒表达质粒plxas-N,该质粒能表达互补猪传染性胃肠炎病毒N基因全长的反义RNA序列。用质脂体方法将重组质粒plxas-N转染至PA317细胞中,经抗生素G418(500μg/ml)筛选出稳定的产毒细胞克隆。分别扩大培养细胞克隆,取其上清液感染小鼠成纤维细胞NIH3T3,测定细胞克隆产生的重组病毒滴度,并用高滴度重组病毒感染IBRS2细胞。提取被感染的IBRS2细胞的总RNA,RT-PCR证明plxas-N整合到IBRS2细胞基因组。通过TGEV分别感染IBRS2和IBRS2抗性细胞产生的病变,结果表明该反义RNA对病毒的复制有抑制作用,其抑制率近50%。

关 键 词:反义RNA  猪传染性胃肠炎病毒  逆转录病毒载体  细胞病变

Antisense RNA-Medidiated Resistance to TGEV Infection In IBRS2 Cells
Authors:Yu Xiaolong
Institution:(The Animal Husbandry Research Center of Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences)
Abstract:
Keywords:Antisense RNA  TGEV  Retrovirus vector  Cytopathic effect (CPE)  
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