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秋茄KcTIP1基因克隆及其对植物耐盐性作用的研究
引用本文:鲁彦君,韩彦莎,李妮亚.秋茄KcTIP1基因克隆及其对植物耐盐性作用的研究[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2013,41(7):162-171.
作者姓名:鲁彦君  韩彦莎  李妮亚
作者单位:北京林业大学 生物科学与技术学院;北京林业大学 生物科学与技术学院;海南师范大学 生物学院
基金项目:国家自然科学基金项目(31160150,31270654,31170570);中央高校基本科研业务费专项(JC2011-2,TD-2012-04);北京市自然科学基金项目(6112017);北京市优秀博士学位论文指导教师专项(YB20081002201);高等学校学科创新引智计划项目(111 Project,B13007)
摘    要:【目的】从秋茄中克隆液泡膜水通道蛋白KcTIP1基因,并研究其对植物耐盐性的作用机制。【方法】以秋茄幼嫩叶片为材料,通过PCR扩增克隆KcTIP1基因并构建其表达载体,采用根癌农杆菌介导法,用含重组质粒的农杆菌转化烟草植株,通过卡那霉素筛选和转基因烟草基因组PCR、RT-PCR鉴定,获得转基因再生植株;并选取其中2个阳性株系和野生型株系进行盐处理,测定野生型烟草(对照)与盐处理烟草根、茎、叶鲜质量,光合参数,叶片组织Na+、K+浓度以及根尖Na+、K+的流速。【结果】成功克隆得到了KcTIP1基因,对其编码蛋白氨基酸序列进行分析表明,秋茄KcTIP1包含MIP家族的特征序列SGGHVNPAVT和2个保守的NPA(Asn-Pro-Ala)位点。RT-PCR检测结果显示,KcTIP1基因在转基因烟草株系中成功表达。盐胁迫后,转基因烟草植株根、茎、叶鲜质量,叶片净光合速率,蒸腾速率,叶片组织Na+、K+积累和根尖Na+、K+内流幅度均高于野生型烟草。【结论】KcTIP1具有与其他水通道蛋白类似的蛋白结构和酶学功能,KcTIP1基因过表达可以提高转基因烟草的抗盐能力。

关 键 词:秋茄  烟草  KcTIP1基因  耐盐性
收稿时间:2013/12/24 0:00:00

Molecular cloning and salt-tolerance of gene KcTIP1 from Kandelia candel
LU Yan-jun,HAN Yan-sha,LI Ni-ya,HOU Pei-chen,HUANG Xu-xin,DENG Shu-rong,ZHAO Rui,SHEN Xin,CHEN Shao-liang.Molecular cloning and salt-tolerance of gene KcTIP1 from Kandelia candel[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2013,41(7):162-171.
Authors:LU Yan-jun  HAN Yan-sha  LI Ni-ya  HOU Pei-chen  HUANG Xu-xin  DENG Shu-rong  ZHAO Rui  SHEN Xin  CHEN Shao-liang
Institution:1 (1 College of Biological Sciences and Technology,Beijing Forestry University,Beijing 100083,China; 2 College of Life Science,Hainan Normal University,Haikou,Hainan 571158,China; 3 National Engineering Research Center for Information Technology in Agriculture,Beijing 100097,China)
Abstract:
Keywords:Kandelia candel  tabacco  KcTIP1 gene  salt tolerance
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