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IGFB-1基因全长cDNA的克隆及表达分析
引用本文:丁为群,梁宏伟,邹桂伟.鲢IGFB-1基因全长cDNA的克隆及表达分析[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2013,41(5):1-8.
作者姓名:丁为群  梁宏伟  邹桂伟
作者单位:昆明理工大学 生命科学与技术学院;中国水产科学研究院 长江水产研究所;中国水产科学研究院 长江水产研究所
基金项目:国家自然科学基金项目(31101894);公益性行业(农业)科研专项(200903045)
摘    要:【目的】克隆鲢胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)基因,分析其编码蛋白的结构与功能,并分析低氧胁迫下该基因在鲢肝脏中的表达情况。【方法】采用cDNA末端快速扩增技术(Rapid amplification of cDNAends,RACE)扩增鲢IGFBP-1基因的全长cDNA,通过半定量RT-PCR法对鲢肌肉、心脏、脑、肾脏、肝脏、腮和脾等组织器官IGFBP-1mRNA的表达水平进行检测,利用Real-time PCR法检测急性低氧胁迫0,2,4,6,8,10和12h后鲢肝脏组织中IGFBP-1表达量的变化。【结果】鲢IGFBP-1全长cDNA为1 081bp,具有73bp的5′非编码区(Un-translated Regions,UTR)、789bp的开放读码框(Open reading frame,ORF),以及219bp的3′UTR,编码含262个氨基酸的蛋白质。RT-PCR结果表明,IGFBP-1在肌肉、心脏、脑、肾脏、肝脏、腮和脾等7种组织中均有表达,其中在肝脏中的表达量最高,心脏和肌肉次之,在脑中的表达量最低;Real-time PCR结果表明,在低氧胁迫6h时,IGFBP-1cDNA在肝脏中的表达量显著增高,随后略有降低但仍显著高于未进行低氧胁迫处理组。【结论】克隆得到鲢IG-FBP-1全长cDNA,该基因在肝脏组织中大量表达;随着低氧胁迫时间的延长,鲢肝脏中IGFBP-1mRNA表达量升高,达最大值后继续低氧胁迫其表达量略有降低。

关 键 词:白鲢  低氧  IGFBP-1  RACE  Real-time  PCR
收稿时间:9/3/2012 12:00:00 AM

Molecular cloning and expression analysis of the full length cDNA of IGFBP1 gene in Hypophthalmichthys molitrix
DING Wei-qun,LIANG Hong-wei,ZOU Gui-wei,WANG Xiao-yang,CAO Lei,LIU Di-qiu,LI Zhong.Molecular cloning and expression analysis of the full length cDNA of IGFBP1 gene in Hypophthalmichthys molitrix[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2013,41(5):1-8.
Authors:DING Wei-qun  LIANG Hong-wei  ZOU Gui-wei  WANG Xiao-yang  CAO Lei  LIU Di-qiu  LI Zhong
Institution:1 College of Life Science and Technology,Kunming University of Science and Technology,Kunming,Yunnan 650500,China; 2 Yangtze River Fisheries Research Institute,Chinese Academy of Fisheries Science,Wuhan,Hubei 430223,China)
Abstract:
Keywords:Hypophthalmichthys molitrix  hypoxic  IGFBP-1  RACE  Real-time PCR
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