金华猪MYLPF基因克隆与序列分析

研究采用Trizol试剂提取70日龄金华猪肝脏组织的总RNA,反转录成c DNA,利用RT-PCR方法扩增MYLPF基因编码区全长序列,将纯化的目的片段与pClone007载体连接,转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选出阳性克隆并测序,然后利用生物信息学软件分析其序列特征,并构建系统进化树。结果表明,金华猪MYLPF基因的c DNA核苷酸序列、RT-PCR产物长度为611 bp,重组后的质粒长度为756 bp,编码169个氨基酸,同源性分析表明,与大白猪的MYLPF氨基酸序列完全相同。MYLPF分子进化树表明金华猪与鸡和斑马鱼的亲缘关系较远,与大白猪的亲缘关系最为接近。