| 山核桃RAPD 反应体系的优化 |
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| 引用本文： | 王正加,黄坚钦,郭传友,杨萍,王华芳.山核桃RAPD 反应体系的优化[J].浙江农林大学学报,2003,20(4):429-433. |
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| 作者姓名： | 王正加 黄坚钦 郭传友 杨萍 王华芳 |
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| 作者单位： | 1.北京林业大学 生物科学与技术学院, 北京 100083;2.浙江林学院 生命科学学院, 浙江 临安 311300;3.南京林业大学 森林资源与环境学院, 江苏 南京 210037 |
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| 基金项目： | 浙江省科学技术厅重大招标项目(0211025); 浙江省自然科学基金重大项目(ZA0208); 杭州市科技局重大攻关项目 (2002112A12) |
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| 摘 要： | 建立山核桃RAPD 反应优化体系是进行山核桃遗传多样性分析的前提。通过对影响PCR 扩增结果的主要因子的组合研究, 确定了山核桃Carya cathayensis 的最适反应体系和扩增程序, 即在20 L 反应体系中, 含2.5 mgL-1 (50 ng)模板, 2.0 L 10 Buffer , 16.67pmols-1Taq DNA 聚合酶;各0.2 mmolL-1dNTPs , 3.0 mmolL-1MgCl2 , 0.3 molL-1引物。扩增程序为:94 ℃预变性300 s , 94 ℃变性30 s , 38 ℃退火30 s , 72 ℃链延伸90 s , 38 次循环, 72 ℃后延伸420 s 。图5 表2 参6
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| 关 键 词： | 林木遗传育种学 山核桃 随机扩增多态性DNA (RAPD) 反应体系 优化 |
| 收稿时间： | 2003-07-04 |
The optimal reaction system of RAPD in Carya cathayensis |
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| WANG Zheng-jia,HUANG Jian-qin,GUO Chuan-you,YANG Ping,WANG Hua-fang.The optimal reaction system of RAPD in Carya cathayensis[J].Journal of Zhejiang A&F University,2003,20(4):429-433. |
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| Authors: | WANG Zheng-jia HUANG Jian-qin GUO Chuan-you YANG Ping WANG Hua-fang |
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| Institution: | 1.School of Biological Science and Biotechnology , Beijing Forestry University , Beijing 10083, China;2.School of Life Sciences, Zhejiang Forestry College , Lin’an 311300, Zhejiang , China;3.College of Forest Resources and Environment , Nanjing Forestry University , Nanjing 210037, Jiangsu, China |
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| Abstract: | The optimized system used in RAPD reaction of Carya cathayensis must be established before analying the genetic diversity ofCarya cathayensis .It is necessary to explore the reaction conditions and system .The optimal reaction mixture and amplification procedure of RAPD in Carya cathayensis were studied .The result showed that each 20 L amplification reaction solution was consisted of 2.5mgL-1 (50 ng)template DNA , 2.0L 10 Buffer , 16.67 pmols-1Taq DNA polymerase , each 0.2mmolL-1dNTPs , 2.4 mmolL-1MgCl2 , 0.15 10-3 mmolL-1 primer .The PCR amplification program is predenature at 94 ℃for 300 s , followed by denature at 94 ℃ 30 s , annealing 38 ℃for 30 s , extension 72 ℃ for 90 s , cycling 38 times , last extension 72 ℃ 420 s . Ch , 5 fig .2 tab .6 ref .] |
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