滇龙胆香叶醇合酶基因的克隆与表达分析 |
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引用本文: | 刘倩倩,李彩霞,赵 静,谷从璟,张晓东.滇龙胆香叶醇合酶基因的克隆与表达分析[J].广东农业科学,2017,44(9):48-55. |
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作者姓名: | 刘倩倩 李彩霞 赵 静 谷从璟 张晓东 |
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作者单位: | 玉溪师范学院资源环境学院,云南 玉溪 653100 |
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基金项目: | 云南省大学生创新项目(201511390005,201511390006);云南省教育厅重点项目(2015Z171) |
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摘 要: | 对滇龙胆香叶醇合酶基因Gr GES进行克隆和表达分析,为研究其在香叶醇和龙胆苦苷生物合成中的作用奠定基础。根据滇龙胆转录组Gr GES序列,采用RT-PCR技术从滇龙胆叶片克隆该基因,获得Gr GES序列(Gen Bank登录号为KJ917168)。序列分析结果表明,Gr GES基因长1 767 bp,编码588氨基酸;Gr GES蛋白相对分子质量为67.84 ku,理论p I为5.56。该蛋白定位于叶绿体,包含叶绿体转运肽,为亲水不稳定蛋白,主要由α-螺旋(62.41%)和环(39.57%)构成。该蛋白具有其他GES蛋白的活性位点、萜类合酶N端结构域(IPR001906,81~273)和萜类合酶结构域(IPR005630,263~588)。Gr GES蛋白与长春花Cr GES蛋白亲缘关系最近。原核表达结果表明,Gr GES基因在大肠杆菌中表达的重组蛋白相对分子质量约为78.22 ku,与预期的大小一致。组织特异性表达分析结果表明,Gr GES基因主要在叶中表达。
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关 键 词: | 滇龙胆 香叶醇合酶 基因克隆 表达分析 |
Cloning and expression analysis of geraniol synthase gene in Gentiana rigescens |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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