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芸薹属TT8基因家族RNA干扰载体的构建
引用本文:张瑞熙,柴友荣,殷家明.芸薹属TT8基因家族RNA干扰载体的构建[J].江苏农业科学,2011,39(6).
作者姓名:张瑞熙  柴友荣  殷家明
作者单位:西南大学农学与生物科技学院/农业部生物技术和作物品质改良重点实验室/重庆市油菜工程中心/重庆市作物品质改良重点实验室,重庆,400716
基金项目:国家自然科学基金,国家"863"计划,重庆市科技攻关项目
摘    要:类黄酮是植物的重要次生代谢物质,拟南芥透明种皮8(TT8)是调控花青素苷、原花青素、种皮黏液生物合成的1个转录因子,参与决定植株彩色、种皮色泽、种皮黏液分泌等性状.本研究采用PCR法从甘蓝型油菜中克隆了592 bp(不计人工酶切位点)的芸薹属TT8基因家族的RNA干扰片段,将其反义片段、正义片段采用No Ⅰ+Swa Ⅰ、BamH Ⅰ+Xba Ⅰ双酶切方式分别插入到改进型植物RNA干扰平台载体pFGC5941M的启动子与间隔区、间隔区与终止子之间,形成了11 380bp的重组载体pFCC5941M - BTT8 Ⅰ(简称为pBTT8 Ⅰ),多种PCR鉴定结果表明构建成功;然后转化根癌农杆菌,获得工程菌株,可用于芸薹属植物相关性状的分子机理研究和遗传修饰.

关 键 词:芸薹属  甘蓝型油菜  RNAi  透明种皮8(TT8)  载体构建
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