丝裂霉素C对ICR小鼠胚胎成纤维细胞饲养层制备的影响

目的：探索不同浓度的丝裂霉素c（MMC）处理对ICR小鼠胚胎成纤维细胞饲养层制备的影响，用于分离和培养干细胞。方法：取13．5d胎龄ICR鼠胚分离原代成纤维细胞，利用不同浓度MMC处理胚胎成纤维细胞制备饲养层，比较观察MMC对细胞增殖的抑制作用，制作细胞生长曲线；取妊娠3．5d的ICR小鼠胚胎在不同浓度MMC处理的饲养层上培养，观察胚胎贴壁和增殖情况。结果与结论：胎儿成纤维细胞贴壁生长，增殖迅速，6代后细胞逐渐衰老；MMC能有效抑制胎儿成纤维细胞的增殖，最佳处理方法为20μg／ml、2h。妊娠3．5d的ICR小鼠胚胎在10、20μg／mlMMC处理的饲养层上孵出率和贴壁率显著高于5／Lg／mlMMC处理的饲养层，在5、10和20μg／mMMC处理的饲养层上，内细胞团增殖率无显著差异。因此，ICR小鼠胚胎成纤维细胞最佳处理方法为20μg／mlMMC作用2h。