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利用差异显示技术克隆辣椒抗疫病相关基因
引用本文:易图永,张宝玺,谢丙炎,高必达.利用差异显示技术克隆辣椒抗疫病相关基因[J].湖南农业大学学报(自然科学版),2005,31(3):258-261.
作者姓名:易图永  张宝玺  谢丙炎  高必达
作者单位:湖南农业大学,生物安全科技学院,湖南,长沙,410128;中国农业科学院,蔬菜花卉研究所,北京,100081;中国农业科学院,蔬菜花卉研究所,北京,100081;湖南农业大学,生物安全科技学院,湖南,长沙,410128
基金项目:农业部蔬菜遗传与生理重点实验室资助项目
摘    要:用辣椒疫霉菌对8叶期的辣椒品种茄门和93-100-17-1-0进行诱导处理,提取接种前后的总RNA,利用mRNA差异显示技术,结合植物抗病基因保守结构域,将DDRT-PCR的一端引物为oligo(dT)15A/G/C,另一端为来源于不同抗病基因同源序列的简并引物B1/C1/D1,其扩增产物在6%聚丙烯酰胺凝胶上得到两个差异表达的带,回收差异片段并克隆到T-载体上测序,经BLAST检索,发现为两个新的序列,GenBank登录号为AY497910,AY497911。

关 键 词:辣椒疫霉菌  mRNA差异显示  抗病基因
文章编号:1007-1032(2005)03-0258-04
修稿时间:2005年4月2日

Application of Differential Display Techniques to the Cloning of Resistant Gene to Phytophthora Blight
YI Tu-yong,ZHANG Bao-Xi,XIE Bing-yan,GAO Bi-da.Application of Differential Display Techniques to the Cloning of Resistant Gene to Phytophthora Blight[J].Journal of Hunan Agricultural University,2005,31(3):258-261.
Authors:YI Tu-yong  ZHANG Bao-Xi  XIE Bing-yan  GAO Bi-da
Institution:YI Tu-yong1,2,ZHANG Bao-xi2,XIE Bing-yan2,GAO Bi-da1
Abstract:We extracted total RNA from the leaves of Qie-men and 93-100-17-1-0 after inoculating with Phytophthora capsici at eight-leaf stage,and gained two different expression on 6% polypropylene gel using DDRT-PCR.Recovering the different fragments,cloning into T-vector,and sequencing.we found that the two sequences are new genes after BLAST,then submitted the two sequences into GenBank,whose accessions are AY497910,AY497911.
Keywords:Phytophthora capsici  mRNA differential display  resistant gene
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