Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒RT—PCR检测方法的建立 |
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作者姓名: | 邵泽香 韦强 鲍国连 崔言顺 刘燕 季权安 |
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作者单位: | 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,浙江杭州310021;2. 山东农业大学动物科技学院,山东泰安271018 |
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基金项目: | 长三角重点项目,浙江省自然科学基金 |
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摘 要: | 参考GenBank中Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-I)的基因序列,应用Primer Premier5.0软件设计了一对引物,建立了适合DHV—I快速检测的RT—PCR检测方法。以该方法对实验室分离并保存的DHV强毒株Z10株的RNA为模板进行RT—PCR扩增,得到了预期大小为699bp的目的片段。将扩增所得的DNA片段进行克隆测序,测序结果与GenBank中的DHV-I的相应基因序列比对分析,同源性均达90%以上.表明为DHV—I的基因序列,对NDV,IBDV,DPV和GPV等常见病毒扩增结果为阴性。该方法敏感性检测结果表明.最低RNA模板检出量为24pg。表明所建立的RT—PCR检测技术具有特异、快速和敏感的特点,可用于Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒的快速诊断。
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关 键 词: | Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-I) RT—PCR 检测 |
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