| 庆大霉素单克隆抗体的研制及ELISA分析方法的建立 |
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| 引用本文： | 金仁耀,吴建祥. 庆大霉素单克隆抗体的研制及ELISA分析方法的建立[J]. 核农学报, 2013, 27(1) |
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| 作者姓名： | 金仁耀 吴建祥 |
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| 作者单位： | 1. 浙江工商大学食品与生物工程学院,浙江杭州,310012
2. 浙江大学生物技术研究所,浙江杭州,310058 |
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| 摘 要： | 用与牛血清蛋白(BSA)交联的庆大霉素人工抗原(GM-BSA)免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选、克隆,得到1株能稳定分泌抗庆大霉素单抗的杂交瘤细胞株(6H8),经鉴定6H8的抗体类型及亚类均为IgG1,其轻链为κ链.制备单克隆抗体腹水,腹水的间接ELISA效价在1×10-7以上.该单克隆抗体与庆大霉素结构类似物均无交叉反应,具有高度特异性.以制备的单抗建立间接竞争ELISA方法,其线性回归方程为y=16.122ln(x)-2.0143(R2=0.9934),抑制中浓度IC50为25.2μg·L-1,最低检测限IC20为3.9μg·L-1.竞争ELISA方法检测鲜奶中的庆大霉素平均回收率在92％～110％之间.抗庆大霉素单抗的制备和竞争ELISA方法的建立为庆大霉素快速检测奠定了基础.
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| 关 键 词： | 庆大霉素 单克隆抗体 竞争ELISA |
PREPARATION OF MONOCLONAL ANTIBODY AND DEVELOPMENT OF AN INDIRECT COMPETITIVE ELISA METHOD FOR GENTAMICIN |
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