AsiaⅠ型口蹄疫病毒江苏分离株VP1基因的克隆与高效表达 |
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引用本文: | 陈昌海,程 雷,徐正军.AsiaⅠ型口蹄疫病毒江苏分离株VP1基因的克隆与高效表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2008,36(7):9-13. |
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作者姓名: | 陈昌海 程 雷 徐正军 |
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作者单位: | 1. 南京农业大学,动物医学院,江苏,南京,210095;江苏省畜牧兽医总站,江苏,南京,210036 2. 江苏省畜牧兽医总站,江苏,南京,210036 3. 南京农业大学,动物医学院,江苏,南京,210095 |
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基金项目: | 江苏省农业三项工程计划项目(SX |
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摘 要: | 【目的】实现牛口蹄疫病毒AsiaⅠ型江苏分离株VP1基因在大肠杆菌中的表达,为VP1蛋白的深入研究奠定基础。【方法】根据GenBank公布的AsiaⅠ型口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)核苷酸序列(登录号:AF030244),设计并合成1对特异性引物,应用RT-PCR方法扩增出牛AsiaⅠ型FMDV江苏分离株VP1基因,将其连接入pMD18-T载体,测序后克隆入原核表达载体pET-32a(+)中,构建原核表达载体pET-VP1。阳性重组质粒转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,收集表达产物并进行SDS-PAGE电泳,利用West-ern-blot分析表达蛋白的抗原性。【结果】牛AisaⅠ型FMDVVP1基因在大肠杆菌中获得高效表达,表达产物的相对分子质量约为43 ku,并能被牛AsiaⅠ型FMDV阳性血清识别,有一定的生物学活性,表达量约占菌体蛋白总量的37.7%。【结论】牛AsiaⅠ型FMDVVP1基因表达成功,且表达产物具有一定的生物学活性。
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关 键 词: | AsiaⅠ型口蹄疫病毒 VP1基因 原核表达 |
收稿时间: | 2007/2/28 0:00:00 |
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