| 绿色荧光蛋白标记荧光假单胞菌P303及其生存能力检测 |
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| 引用本文： | 张霞,张杰,李国勋,黄大昉,陈中义.绿色荧光蛋白标记荧光假单胞菌P303及其生存能力检测[J].植物保护学报,2005,32(3):280-286. |
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| 作者姓名： | 张霞 张杰 李国勋 黄大昉 陈中义 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室，中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室，河北农业大学植物保护学院，中国农业科学院生物技术研究所，中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室 北京100094 河北农业大学植物保护学院，保定070001，北京100094，保定070001，北京100081，北京100094 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 构建了含有荧光假单胞菌自身启动子PP303的中间质粒载体pGFP.然后利用mini-Tn5转座子,通过接合转移,将两个带有不同启动子的绿色荧光蛋白基因分别整合到荧光假单胞菌P303染色体上,获得了在488nm波长下发光稳定的P303m1和P303m3菌株.PCR鉴定和Southern印迹结果均证明绿色荧光蛋白已随机插入P303染色体.SDS-PAGE结果表明,含有PA1/04/03启动子的P303m3菌株GFP表达量低于含有PP303启动子的P303m1菌株,染色体标记的GFP表达量低于质粒标记.室内平板抑菌试验结果表明,P303m1与出发菌株P303抑菌活性相当,对九种植物病原真菌有较强的拮抗作用.定殖、生存竞争能力研究表明,荧光假单胞菌在自然土壤中和大白菜根际都具有较强的定殖能力.P303和P303m1在自然土壤中第60天的菌量分别为1.63×104和3.3×102cfu/g土(湿重),大白菜根际第50天的菌量分别为3.29×106和4.1×104cfu/g根(湿重).
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| 关 键 词： | 荧光假单胞菌 绿色荧光蛋白 接合转移 Southern杂交 定殖 |
| 收稿时间： | 2004-06-30 |
| 修稿时间： | 2004年6月30日 |
Labeling of Pseudomonas fluorescens P303 strain with green fluorescent protein and monitoring of its survival ability |
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| ZHANG Xi,ZHANG Jie,LI Guo-xun,HUANG Da-fang and CHEN Zhong-yi.Labeling of Pseudomonas fluorescens P303 strain with green fluorescent protein and monitoring of its survival ability[J].Acta Phytophylacica Sinica,2005,32(3):280-286. |
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| Authors: | ZHANG Xi ZHANG Jie LI Guo-xun HUANG Da-fang and CHEN Zhong-yi |
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| Institution: | State Key Lab for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, CAAS, Beijing 100094,China; Agricultural University of Hebei,Baoding 071001,China;State Key Lab for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, CAAS, Beijing 100094,China;Agricultural University of Hebei,Baoding 071001,China;Biotechnology Research Institute,CAAS,Beijing 100081,China;State Key Lab for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, CAAS, Beijing 100094,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pseudomonasfluorescens green fluorescent protein conjugation Southern blot colonization |
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