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| 禽传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中的表达 | |
| 引用本文： | 余祖华,王红宁,周生,黄勇,柳萍. 禽传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中的表达[J]. 中国兽医学报, 2007, 27(6): 799-802 |
| 作者姓名： | 余祖华 王红宁 周生 黄勇 柳萍 |
| 作者单位： | 1. 四川农业大学,动物科技学院,四川,雅安,625014;河南科技大学,动物科技学院,河南,洛阳,471003 2. 四川农业大学,动物科技学院,四川,雅安,625014;四川大学,生命科学院,四川,成都,610064 3. 四川农业大学,动物科技学院,四川,雅安,625014 |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
| 摘 要： | 根据GenBank已公布的传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)株S1基因序列及pPIC9K表达载体序列,设计1对IBV S1基因表达片段的PCR引物,用RT-PCR方法扩增出长度为1 566 bp IBV S1基因表达片段,5′端不含信号肽序列,3′端添加了终止密码子。用限制性内切酶SnaB和Not将S1基因和载体pPIC9K酶切回收后连接,构建了重组表达载体pPIC9K-S1。用限制性内切酶Bgl将表达质粒pPIC9K-S1线性化,然后用电转化的方法导入毕赤酵母GS115,在MD平板上生长的转化子经过PCR鉴定和表型筛选后,获得了整合型阳性重组菌株GS115/pPIC9K-S1 His Muts。将重组菌株在1%甲醇中进行诱导分泌表达,并对表达产物进行SDS-PAGE、Western blot分析。结果显示,IBV S1基因在毕赤酵母中成功获得了表达,表达蛋白的分子量约为76 000,能与IBV阳性血清特异性结合,表达的蛋白占上清中总蛋白量的12.5%。 |
| 关 键 词： | 禽传染性支气管炎病毒 S1基因 毕赤酵母 分泌表达 |
| 文章编号： | 1005-4545（2007）06-0799-04 |
| 修稿时间： | 2006-02-21 |
Expression of avain infectious bronchitis virus S1 gene in Pichia pastoris |
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| YU Zu-hua,WANG Hong-Ning,ZHOU Sheng,HUANG Yong,LIU Ping. Expression of avain infectious bronchitis virus S1 gene in Pichia pastoris[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2007, 27(6): 799-802 | |
| Authors: | YU Zu-hua WANG Hong-Ning ZHOU Sheng HUANG Yong LIU Ping |
| Abstract: | |
| Keywords: | avian infectious bronchitis virus S1 gene Pachia pastoris secreted expression |
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