利用MS2识别序列标签纯化技术富集猪链球菌小RNA结合蛋白

为建立理想的猪链球菌RNA结合蛋白筛选方法,以该菌小RNA rss04和rss06为研究对象,通过纯化MS2序列识别蛋白MS2-MBP,构建表达MS2融合RNA(MS2-rss04与MS2-rss06)的质粒p SET2-MS2-rss04、pSET2-MS2-rss06及阴性对照质粒p SET2-MS2-negative,将上述质粒分别电转化至猪链球菌小RNA缺失株Δrss04、Δrss06及野生株P1/7,通过MS2识别序列标签纯化,收集洗脱液,提取RNA。结果显示:表达MS2融合RNA的样品,rss04和rss06分别富集16倍和110倍,而阴性对照组未检测到rss04和rss06的富集。结果表明:MS2识别序列纯化体系成功建立,可用于猪链球菌RNA结合蛋白的筛选,为深入研究猪链球菌小RNA功能提供技术平台。