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| 稳定表达LamR的RK13细胞系的建立及RHDV吸附能力的初步研究 | |
| 作者姓名： | 黄萍 宋艳华 胡波 魏后军 范志宇 仇汝龙 陈萌萌 薛家宾 王芳 JUNG Yong-Sam |
| 作者单位： | 南京农业大学动物医学院/教育部动物健康与食品安全国际合作联合实验室;江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 |
| 摘 要： | 为建立稳定表达层黏连蛋白受体(LamR)RK13细胞系(RK13-LamR),并研究LamR蛋白在兔出血症病毒(RHDV)与宿主细胞结合中的作用,将完整的LamR序列通过同源重组克隆入慢病毒表达载体pLVX-m Cherry,并将该重组质粒pLVX-m Cherry-LamR与慢病毒包装质粒pLP1、pLP2、pLP/VSVG共转染293T细胞,在293T细胞中包装成含目的基因的重组慢病毒。将收获的重组病毒感染RK13细胞,经过嘌呤霉素筛选和细胞有限稀释法,筛选出表达LamR蛋白的RK13细胞。通过间接免疫荧光试验(IFA)和Western blotting证明所获细胞株能够稳定表达LamR蛋白,将细胞株命名为RK13-LamR。以纯化的RHDV接种RK13-LamR细胞,IFA检测结果显示,LamR蛋白能促进RHDV对RK13细胞的吸附。本研究建立了RHDV相对敏感的细胞株,证实在RHDV吸附宿主细胞的过程中,LamR蛋白起到一定的作用。 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |