| 牛胰腺 DNaseⅠ基因的合成、表达及功能验证 |
| |
| 引用本文： | 覃鸿妮,谢钰珍,薛高旭,梅啸,沈为琴,蔡一林.牛胰腺 DNaseⅠ基因的合成、表达及功能验证[J].西南农业大学学报,2018,40(6):24-31. |
| |
| 作者姓名： | 覃鸿妮 谢钰珍 薛高旭 梅啸 沈为琴 蔡一林 |
| |
| 作者单位： | 苏州工业园区服务外包职业学院;金唯智生物科技有限公司;西南大学玉米研究所 |
| |
| 基金项目： | 重庆市重大项目(cstc2016shms-ztzx80016)；苏州市高职高专院校教改项目(2017SZJG015) |
| |
| 摘 要： | 从NCBI下载牛胰腺DNaseⅠ蛋白序列,利用密码子优化软件(Codon Optimization)进行序列优化,设计并合成24条首尾重叠的引物合成786bp的DNaseⅠ基因,构建重组载体pET30a-DNaseⅠ,转入BL21(DE3),ArcticExpress(DE3),BL21(DE3)pLysS 3种感受态中诱导表达后,纯化目的蛋白并验证其活性.结果表明:BL21(DE3),ArcticExpress(DE3)两种感受态菌落生长异常,且未纯化到目的蛋白,BL21(DE3)pLysS感受态菌落生长正常,但未经诱导和葡萄糖诱导表达的菌液中也未纯化到目的蛋白,IPTG诱导扩大培养的菌液中纯化到0.15 mg/mL的目的蛋白.经验证,酶原液能彻底消化λ-DNA和不同大小的质粒DNA,酶稀释液消化产物电泳检测显示条带拖尾弥散,表明酶稀释液只能消化部分λ-DNA.
|
| 关 键 词： | DNaseⅠ 基因合成 基因表达 基因功能验证 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《西南农业大学学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《西南农业大学学报》下载免费的PDF全文 |
|
