新型CephodexD微载体在猪瘟病毒大规模增殖中的应用研究 |
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引用本文: | 梅建国,庄金秋,吴信明,刘吉山,苗立中,张颖,谢金文,林初文,王本琢,丁壮.新型CephodexD微载体在猪瘟病毒大规模增殖中的应用研究[J].畜牧与兽医,2018(8). |
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作者姓名: | 梅建国 庄金秋 吴信明 刘吉山 苗立中 张颖 谢金文 林初文 王本琢 丁壮 |
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作者单位: | 吉林大学动物医学学院;山东省滨州畜牧兽医研究院;滨州贝尔凯瑞生物技术有限公司;无棣县畜牧兽医局 |
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摘 要: | 旨在应用新型Cephodex D微载体悬浮培养ST细胞增殖猪瘟病毒。通过优化工艺条件初步实现了病毒抗原的大规模高效生产,培养过程采用流加方式保证ST细胞的营养供应。用含6%(v/v)无牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)及其抗体的双阴牛血清MEM生长液培养ST细胞。当达到3.8×109个细胞时,接种入生物反应器中,Cephodex D微载体用量为4 g/L。当反应器内ST细胞生长至48 h,接种猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)液。继续培养4 d后进行首次病毒收获,之后每3 d收获1次,直至第5次收毒结束。整个培养过程持续18d,细胞培养至72 h,密度可达2.8×106cells/m L,生产的CSFV滴度均在100万兔体反应量(RID)/m L以上。较现有的国家标准相比,应用生物反应器和新型Cephodex D微载体悬浮培养技术,不仅病毒滴度提高了1倍,而且整个生产周期缩短了5 d,大大提高了生产效率。因此,本研究采用的新型微载体悬浮培养工艺在CSFV大规模生产中具有重要的应用价值。
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