半矮生桃基因组DNA的提取及SSR-PCR反应体系的优化 |
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引用本文: | 韩世明,王志强,牛良,鲁振华,刘淑娥,宋银花,李春奇. 半矮生桃基因组DNA的提取及SSR-PCR反应体系的优化[J]. 江苏农业科学, 2010, 0(1) |
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作者姓名: | 韩世明 王志强 牛良 鲁振华 刘淑娥 宋银花 李春奇 |
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作者单位: | 1. 河南农业大学生命科学学院,河南郑州,450002;中国农业科学院郑州果树研究所,河南郑州,450009 2. 中国农业科学院郑州果树研究所,河南郑州,450009 3. 河南农业大学生命科学学院,河南郑州,450002 |
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基金项目: | 国家自然科技基金(编号:30871682) |
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摘 要: | 为获得高纯度高质量的DNA和建立稳定的SSR-PCR反应体系,采用常规CTAB法和改进CTAB法提取半矮生桃基因组DNA。结果表明:改良CTAB法提取的DNA纯度高,多糖和蛋白质含量低,可用于SSR反应。同时,通过对影响SSR反应的6个要素设计正交试验,确定了最优的SSR-PCR反应体系,20μL反应体系为:25 mmol/LMg2+1.5μL、2.5 mmol/L dNTPs 2μL、5 U的Taq酶0.22μL、10×Buffer缓冲液4μL、10 mmol/L引物0.6μL、20 ng模板0.8μL,优化的退火温度为57.6℃。
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关 键 词: | 半矮生 桃 基因组DNA SSR |
Extraction of genome DNA and optimization of simple sequence repeat (SSR) reaction system in Semi-dwarf peach |
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Abstract: | |
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Keywords: | SSR |
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