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半矮生桃基因组DNA的提取及SSR-PCR反应体系的优化
引用本文:韩世明,王志强,牛良,鲁振华,刘淑娥,宋银花,李春奇.半矮生桃基因组DNA的提取及SSR-PCR反应体系的优化[J].江苏农业科学,2010(1).
作者姓名:韩世明  王志强  牛良  鲁振华  刘淑娥  宋银花  李春奇
作者单位:1. 河南农业大学生命科学学院,河南郑州,450002;中国农业科学院郑州果树研究所,河南郑州,450009
2. 中国农业科学院郑州果树研究所,河南郑州,450009
3. 河南农业大学生命科学学院,河南郑州,450002
基金项目:国家自然科技基金(编号:30871682)
摘    要:为获得高纯度高质量的DNA和建立稳定的SSR-PCR反应体系,采用常规CTAB法和改进CTAB法提取半矮生桃基因组DNA。结果表明:改良CTAB法提取的DNA纯度高,多糖和蛋白质含量低,可用于SSR反应。同时,通过对影响SSR反应的6个要素设计正交试验,确定了最优的SSR-PCR反应体系,20μL反应体系为:25 mmol/LMg2+1.5μL、2.5 mmol/L dNTPs 2μL、5 U的Taq酶0.22μL、10×Buffer缓冲液4μL、10 mmol/L引物0.6μL、20 ng模板0.8μL,优化的退火温度为57.6℃。

关 键 词:半矮生    基因组DNA  SSR  

Extraction of genome DNA and optimization of simple sequence repeat (SSR) reaction system in Semi-dwarf peach
Abstract:
Keywords:SSR
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