| 通过RACE技术构建铁皮石斛叶mRNA的cDNA PCR文库 |
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| 作者姓名： | 冯沛春 崔毅慧 张子凤 朱乾坤 王万军 |
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| 作者单位： | 西南交通大学生命科学与工程学院,四川成都610031;西南交通大学生命科学与工程学院,四川成都610031;西南交通大学生命科学与工程学院,四川成都610031;西南交通大学生命科学与工程学院,四川成都610031;西南交通大学生命科学与工程学院,四川成都610031 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31271302) |
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| 摘 要： | 基于RACE技术,以铁皮石斛叶片总RNA为起始材料,通过逆转录和末端转移构建出两端含有特定序列的cDNA。然后以连接有特定序列的引物进行cDNA的PCR扩增,从而构建出mRNA的cDNA PCR文库。结果表明:cDNA PCR文库的PCR效果明显高于逆转录产物的PCR效果,该方法构建的cDNA PCR文库能使cDNA放大100倍以上;以5pg的总RNA为起始材料构建cDNA PCR文库仍可得到良好的PCR扩增效果;该研究的cDNA PCR文库构建方法费用较低,操作简单,为克隆微量表达的基因提供了技术基础。
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| 关 键 词： | cDNA PCR文库 RACE 逆转录 PCR |
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