油桐花芽RNA提取方法的改良及油桐SOC1基因片段的克隆分析 |
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作者姓名: | 罗敏 孙颖 陈显 李建安 熊利 |
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作者单位: | 中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室,湖南长沙,410004;大洪山风景名胜区管理委员会,湖北随州,431521 |
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基金项目: | 湖南省研究生创新基金资助项目(CX2012B320);中南林业科技大学研究生创新基金资助项目(CX2012B03) |
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摘 要: | 采用RNAiso-mate+改良CTAB法进行油桐花芽RNA的提取试验,用琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性,核酸蛋白质检测仪检测其纯度,研究提取油桐花芽高质量RNA的方法。结果表明:RNAiso-mate+改良CTAB方法提取的RNA质量好,条带清晰,亮度高,完整性及纯度较好,A260/A280比值为1.97、1.93,得率176.9、154.2μg/mL。在提取到的高质量RNA基础上,采用RT-PCR方法成功克隆了油桐SOC1基因片段,长度为611bp,含起始密码子,编码203个氨基酸;序列分析表明油桐SOC1基因与蓖麻、杨树、大豆的SOC1基因相似度分别为85%、84%、78%,进化树分析得出油桐SOC1基因与北美木兰SOC1基因亲缘关系较近。
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关 键 词: | 油桐 花芽 RNA提取 SOC1基因 |
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