樱桃荧光AFLP反应体系优化及应用 |
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引用本文: | 田长平,张福兴,刘晓静,张序,孙庆田.樱桃荧光AFLP反应体系优化及应用[J].北方园艺,2014(14). |
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作者姓名: | 田长平 张福兴 刘晓静 张序 孙庆田 |
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作者单位: | 烟台市农业科学研究院,山东烟台,265500;烟台市福山区果茶站,山东烟台,265500 |
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基金项目: | 山东省现代农业产业技术体系水果创新团队建设专项基金资助项目(SDAIT-03-022-02);国家公益性行业(农业)科研专项资助项目(200903019) |
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摘 要: | 以12个甜樱桃品种和4个中国樱桃品种为试材,对荧光AFLP分析过程中模板DNA的制备、酶切与连接、酶切连接产物的预扩增与选择性扩增、聚丙烯酰胺凝胶电泳等过程中易出现的问题及其解决方法进行了研究。结果表明:改良CTAB法提取甜樱桃嫩叶和老叶DNA效果均很好;200ng DNA双酶切反应4h,连接产物稀释10倍作为预扩增模板,预扩增产物稀释20倍作为选择性扩增的模板;筛选了64对引物,其中8对扩增效果理想,能够得到清晰、稳定的条带,平均每对引物扩增条带为40.6条,建立了樱桃AFLP分子标记技术体系;该体系的建立为研究甜樱桃遗传多样性和标记重要农艺性状奠定了基础。
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关 键 词: | 樱桃 荧光AFLP 优化 应用 |
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