| 适合库尔勒香梨SCoT分析用的DNA提取方法研究 |
| |
| 引用本文： | 和世玉,牛建新. 适合库尔勒香梨SCoT分析用的DNA提取方法研究[J]. 新疆农业科学, 2014, 51(8): 1417 |
| |
| 作者姓名： | 和世玉 牛建新 |
| |
| 作者单位： | 石河子大学农学院/园艺作物栽培生理与种质资源利用重点实验室,新疆石河子,832003 |
| |
| 基金项目： | 兵团“科技人员服务南疆专项”库尔勒香梨优良营养变异类型的AFLP分子鉴定研究，兵团科技攻关计划“香梨新品种选育与高产高效栽培创建示范” |
| |
| 摘 要： | [目的]有效利用SCoT分子标记法对库尔勒香梨优良营养系中相关基因,获得高质量基因组DNA,对目前常用的3种提取植物基因组DNA的方法进行比较研究,研究最适合库尔勒香梨SCoT分析的DNA提取方法.[方法]采用改良CTAB法,改良SDS法和试剂盒法从库尔勒香梨优良营养系的叶片中提取基因组DNA.采用NANODROP 2000核酸仪检测DNA浓度和纯度,并用1.2;琼脂糖凝胶电泳检测其完整性.以3种方法提取的基因组DNA为模板分别进行SCoT-PCR.[结果]改良CTAB法提取的基因组DNA的浓度为600 ～1 600 ng/μL,A260/A280为1.8 ～2.0,A260/A230＜2.0,电泳结果显示:有一条清晰的带,有拖尾现象,点样孔发亮;改良SDS法提取的基因组DNA的浓度为600 ～ 900 ng/μL,A260/A280为1.8 ～2.0,A260/A230为1.9 ～2.2,电泳结果显示:一条清晰的带,无拖尾现象只有一个点样孔发亮;试剂盒法提取的基因组DNA的浓度为100 ～ 200 ng/μL,A260/A280为1.8 ～2.0,A260/A230为2.2 ～2.5,电泳结果显示:一条清晰的带,无拖尾,无点样孔发亮现象,蛋白、多糖、酚类物质、RNA等去除彻底;以3种方法提取的基因组DNA为模板进行SCoT-PCR,PCR产物电泳结果显示:试剂盒法提取的DNA可以扩增出7条清晰明亮的带,改良CTAB法提取的DNA只能扩增出4条清晰的带,改良SDS法提取的DNA只能扩增出2条带.[结论]比较目前常用的3种提取植物基因组DNA的方法,综合成本高低,毒性大小,步骤多少,时间长短,试剂盒法是最适合提取库尔勒香梨优良营养系叶片基因组DNA的方法.
|
| 关 键 词： | 库尔勒香梨 DNA提取 SCoT分子标记 |
| 收稿时间： | 2014-08-25 |
A Genomic DNA Extraction Method of Korla Fragrant Pear for SCoT Analysis |
| |
| HE Shi-yu,NIU Jian-xin. A Genomic DNA Extraction Method of Korla Fragrant Pear for SCoT Analysis[J]. Xinjiang Agricultural Sciences, 2014, 51(8): 1417 |
| |
| Authors: | HE Shi-yu NIU Jian-xin |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Korla Fragrant Pear DNA extract SCoT |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《新疆农业科学》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《新疆农业科学》下载全文 |
|
