| 川西獐牙菜SmGES基因的克隆、生物信息学分析与原核表达 |
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| 引用本文： | 李晓雪,孙继奇,王天宇,田丰收,张程,朱晔荣,向蓓蓓,王勇. 川西獐牙菜SmGES基因的克隆、生物信息学分析与原核表达[J]. 中国农学通报, 2020, 36(25): 19-25. DOI: 10.11924/j.issn.1000-6850.casb20190800552 |
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| 作者姓名： | 李晓雪 孙继奇 王天宇 田丰收 张程 朱晔荣 向蓓蓓 王勇 |
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| 作者单位： | 1.南开大学生命科学学院,天津 300071;2.天津中医药大学中药学院,天津 301617 |
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| 基金项目： | 天津市自然科学基金“藏药川西獐牙菜呫吨酮类化合物合成生物学关键元件的初步研究”(18JCQNJC14000);国家自然科学基金“川西獐牙菜环烯醚萜合成酶的克隆和功能验证”(81303303) |
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| 摘 要： | 研究藏药川西獐牙菜中环烯醚萜合成途径中的关键酶香叶醇合成酶的功能,并探讨其在香叶醇、龙胆苦苷和獐牙菜苦苷生物合成中的作用。以川西獐牙菜叶片为材料,提取RNA并反转为cDNA,通过川西獐牙菜转录组相关信息,用RT-PCR技术克隆得到了川西獐牙菜香叶醇合成酶基因,并命名为SmGES基因。将SmGES基因片段通过分子生物学的方法连接到原核表达载体pET-28a上并转化到Escherichia coli Rosetta(DE3)原核表达感受态中,进行相关的诱导表达。通过生物信息学进行相关分析得出,SmGES基因长1761 bp,编码586个氨基酸;SmGES蛋白等电点为5.35,相对分子质量为67.78 kDa。分析表明SmGES基因带有叶绿体转运肽,预测其是定位于叶绿体的亲水蛋白。文章还分析了该蛋白的细胞内定位、结构域、二级和三级结构。进化关系分析表明,SmGES基因与滇龙胆的GES基因具有较近的亲缘关系。诱导得到重组蛋白分子质量67.78 kDa的蛋白条带,与预期大小一致。研究结果为进一步阐明川西獐牙菜中环烯醚萜合成途径提供参考。
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| 关 键 词： | 川西獐牙菜 香叶醇合成酶基因 基因克隆 生物信息学 原核表达 |
| 收稿时间： | 2019-08-19 |
Cloning,Bioinformatics Analysis and Prokaryotic Expression of SmGES Gene in Swertia mussotii |
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| Li Xiaoxue,Sun Jiqi,Wang Tianyu,Tian Fengshou,Zhang Cheng,Zhu Yerong,Xiang Beibei,Wang Yong. Cloning,Bioinformatics Analysis and Prokaryotic Expression of SmGES Gene in Swertia mussotii[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2020, 36(25): 19-25. DOI: 10.11924/j.issn.1000-6850.casb20190800552 |
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| Authors: | Li Xiaoxue Sun Jiqi Wang Tianyu Tian Fengshou Zhang Cheng Zhu Yerong Xiang Beibei Wang Yong |
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| Affiliation: | 1.College of Life Science, Nankai University, Tianjin 300071;2.School of Chinese Materia Medica, Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 301617 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Swertia mussotii geraniol synthase gene gene cloning bioinformatics analysis expression analysis |
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