| 禾谷镰孢菌β-微管蛋白基因的克隆及在原核细胞中的表达 |
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| 作者姓名： | 张聪 徐建强 于俊杰 陈长军 王建新 周明国 |
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| 作者单位： | 1. 南京农业大学植物保护学院/农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室,江苏,南京,210095
2. 南京农业大学植物保护学院/农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室,江苏,南京,210095;河南科技大学林学院,河南,洛阳,471003 |
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| 摘 要： | 分别扩增了禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)对多菌灵(MBC)敏感菌株(MBCS)的β1-微管蛋白基因(β1-S)和β2-微管蛋白基因(β2-S),及多菌灵中抗菌株(MBCMR)和高抗菌株(MBCHR)的β2-微管蛋白基因(β2-MR和β2-HR),测序正确后连接到pET32a(+)原核表达载体上,转化至大肠杆菌Rosepta感受态中,经IPTG(1 mmol.L-1)诱导,得到了N末端融合6×His纯化标签的表达产物。SDS-PAGE电泳分析表明:在大肠杆菌中表达了相对分子质量约68×103的蛋白,和预测蛋白大小一致,表达的产物主要以包涵体的形式存在。表达的蛋白经HisTrapTM HP Columns纯化并做了Western-blot验证,结果表明,该蛋白能与抗His标签的单抗发生特异性反应。
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| 关 键 词： | 禾谷镰孢菌 β-微管蛋白基因 原核表达 纯化 Western-blot |
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