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基于环介导等温扩增技术的暗褐书虱可视化鉴定
引用本文:周岳阳,曾令瑜,杨文钊,冯士骞,李志红. 基于环介导等温扩增技术的暗褐书虱可视化鉴定[J]. 植物保护学报, 2022, 49(3): 792-798
作者姓名:周岳阳  曾令瑜  杨文钊  冯士骞  李志红
作者单位:中国农业大学植物保护学院, 农业农村部植物检疫性有害生物监测防控重点实验室, 北京 100193
基金项目:国家重点研发计划(2018YFE0108700);财政部和农业农村部国家现代农业产业技术体系(CARS-02-32)
摘    要:为防控暗褐书虱Liposcelis brunnea入侵和扩散,以mtDNA COI基因为靶标设计环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)特异性内外引物,测定引物的特异性和灵敏度,并对暗褐书虱DNA粗提液进行LAMP可视化鉴定检测。结果显示,所设计的暗褐书虱LAMP引物特异性良好,DNA浓度的检测灵敏度为1.0×10-2ng/μL;在65℃下恒温反应45 min后,暗褐书虱LAMP反应体系呈黄色(阳性反应),而其他啮虫昆虫的LAMP反应体系均呈紫红色(阴性反应),以DNA粗提液和以试剂盒法提取的DNA的LAMP可视化鉴定检测结果相同,但鉴定时间缩短到了1 h内,表明所建立的LAMP可视化鉴定技术高效、灵敏、操作简单,可快速准确地鉴定暗褐书虱。

关 键 词:暗褐书虱  环介导等温扩增  mtDNA COI基因  分子鉴定  可视化鉴定
收稿时间:2021-05-24

Visual identification of booklouse Liposcelis brunnea based on loop-mediated isothermal amplification
Zhou Yueyang,Zeng Lingyu,Yang Wenzhao,Feng Shiqian,Li Zhihong. Visual identification of booklouse Liposcelis brunnea based on loop-mediated isothermal amplification[J]. Acta Phytophylacica Sinica, 2022, 49(3): 792-798
Authors:Zhou Yueyang  Zeng Lingyu  Yang Wenzhao  Feng Shiqian  Li Zhihong
Affiliation:Key Laboratory of Surveillance and Management for Plant Quarantine Pests of Ministry of Agriculture and Rural Affairs, College of Plant Protection, China Agricultural University, Beijing 100193, China
Abstract:
Keywords:Liposcelis brunnea  loop-mediated isothermal amplification (LAMP)  mtDNA COI gene  molecular identification  visual identification
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