应用TALENs技术定向敲除烟草eIF4E-6基因 |
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引用本文: | 宋琳娜,杨鹏九,万秀清,乔婵,潘洪杏,郭振楠,刘侠,郭兆奎,李若.应用TALENs技术定向敲除烟草eIF4E-6基因[J].安徽农业科学,2017,45(4). |
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作者姓名: | 宋琳娜 杨鹏九 万秀清 乔婵 潘洪杏 郭振楠 刘侠 郭兆奎 李若 |
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作者单位: | 牡丹江师范学院,黑龙江牡丹江157100;牡丹江烟草科学研究所,黑龙江牡丹江157011;黑龙江省烟草专卖局,黑龙江哈尔滨,150010;牡丹江烟草科学研究所,黑龙江牡丹江,157011;牡丹江医学院,黑龙江牡丹江,157011 |
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基金项目: | 中国烟草总公司科技项目[110201301010,110201501015(JY-02)],中国烟草总公司黑龙江省公司科技项目 |
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摘 要: | 目的]利用TALENs技术定向敲除烟草eIF4E-6基因,为提高优质烤烟品种K326的马铃薯Y病毒(PVY)抗性提供材料。方法]构建特异靶向烟草eIF4E-基因的TALENs载体,并由农杆菌介导转化K326烟草,用PCR和克隆测序方法筛选目的基因被成功编辑的T_0代转基因烟株。结果]构建了2个特异靶向eIF4E-6基因的TALENs载体T_3和T_4。2个载体各获得了约40和50株阳性转化的K326 T_0代烟株。T_3载体获得1株目的基因靶位点发生大片段碱基缺失的杂合突变型T_0代单株、3株靶位点发生碱基替换的杂合突变型T_0代单株。T_4载体获得5株靶位点发生碱基替换的杂合突变型T_0代单株。结论]利用TALENs技术获得的eIF4E-6基因杂合突变型K326 T_0代单株为后续获得纯合基因敲除的K326烟草,并最终获得PVY病毒抗性改良的K326烟草材料奠定了基础。
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关 键 词: | 烟草 PVY K326 eIF4E-6基因 TALENs |
The Directional Knockout of eIF4E-6 Gene Using TALENs Technique |
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Abstract: | |
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Keywords: | Tobacco PVY K326 eIF4E-6 gene TALENs |
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