| RNAi抑制PrP表达载体的构建及其在PrP功能研究中的初步应用 |
| |
| 引用本文： | 李玉荣,周向梅,尹晓敏,杨建民,乔俊文,赵德明.RNAi抑制PrP表达载体的构建及其在PrP功能研究中的初步应用[J].畜牧兽医学报,2008,39(3):337-342. |
| |
| 作者姓名： | 李玉荣 周向梅 尹晓敏 杨建民 乔俊文 赵德明 |
| |
| 作者单位： | 1. 中国农业大学动物医学院,国家动物传染性海绵状脑病实验室,北京,100094;河北农业大学动物科技学院,保定,071000
2. 中国农业大学动物医学院,国家动物传染性海绵状脑病实验室,北京,100094 |
| |
| 基金项目： | 国家自然基金(30500371);国家科技支撑计划(2006BAD06A14);科技部基金(2005KDA 21205-7) |
| |
| 摘 要： | 本文旨在构建有效抑制朊蛋白（Prion protein，PrP）表达的重组质粒，并以此为工具控制PrP表达，从而探讨PrP对细胞SOD活性的影响。设计并化学合成1对含有发夹结构的寡核苷酸片段（shPrP），退火后与表达载体pG-super（Hairpin siRNA expressing vector）定向连接，构建重组质粒pG-super-shPrP。对重组子进行PCR鉴定，测序正确后，脂质体法转染C6细胞，采用实时荧光定量RT-PCR检测PrP mRNA的表达水平，以验证pG-super-shPrP的抑制效率；结果表明：重组质粒pG-super-shPrP构建成功，且显著降低C6细胞PrP mRNA表达（P〈0．05），抑制效率为34．2％。利用pG-super、pG-super-shPrP分别转染C6细胞，并检测细胞SOD总活性及SOD表达水平，探讨PrP对细胞SOD活性的影响及其作用机制，结果表明PrP促进细胞SOD的活性（P〈0．01），但对细胞SOD的表达量无影响，即PrP对SOD活性的促进作用与SOD1的表达量无关。本研究在成功构建了PrP的RNA干扰表达质粒的基础上，利用此质粒，在细胞水平上揭示了PrP对细胞SOD活性的促进作用。
|
| 关 键 词： | RNAi C6细胞 朊蛋白 表达 超氧化物歧化酶 |
| 文章编号： | 0366-6964(2008)03-0337-06 |
| 修稿时间： | 2007年4月17日 |
The Establishment and Application of Inhibited Expression Vector of Prion Protein by RNA Interference |
| |
| LI Yu-rong,ZHOU Xiang-mei,YIN Xiao-min,YANG Jian-min,QIAO Jun-wen,ZHAO De-ming.The Establishment and Application of Inhibited Expression Vector of Prion Protein by RNA Interference[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2008,39(3):337-342. |
| |
| Authors: | LI Yu-rong ZHOU Xiang-mei YIN Xiao-min YANG Jian-min QIAO Jun-wen ZHAO De-ming |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | RNAi |
| 本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
